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HPLC法测定芒果苷苷元的油水分配系数

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HPLC法测定芒果苷苷元的油水分配系数

摘要：本研究采用高效液相色谱法（HPLC）测定芒果苷苷元的油水分配系数。通过优化色谱条件，建立了芒果苷苷元在正己烷与水相之间的分配系数测定方法。实验结果表明，该方法具有良好的准确度和精密度。本文详细介绍了实验过程、结果分析和讨论，为芒果苷苷元的药理活性研究提供了重要参考依据。关键词：芒果苷苷元；高效液相色谱法；油水分配系数；药理活性

前言：芒果苷苷元是一种具有多种生物活性的天然产物，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种药理作用。近年来，随着对芒果苷苷元药理活性的深入研究，其在医药领域的应用前景逐渐受到关注。油水分配系数是评价药物生物利用度和毒性的重要参数，因此，研究芒果苷苷元的油水分配系数对于其药理活性研究具有重要意义。本文旨在建立一种高效液相色谱法测定芒果苷苷元的油水分配系数的方法，并通过实验验证其准确性和可靠性。

一、1.材料与方法

1.1实验材料

(1)实验材料主要包括芒果苷苷元样品、正己烷、甲醇、乙腈等有机溶剂，以及去离子水等水相溶剂。芒果苷苷元样品购自国内知名化学试剂公司，纯度为98%以上，用于实验的样品在室温下储存，避免光照和潮湿。正己烷、甲醇、乙腈等有机溶剂均购自国内知名化学试剂公司，纯度为分析级，用于制备溶液时，均采用新鲜配制的方法以确保实验的准确性。去离子水为实验室自制，电阻率大于18MΩ·cm，符合实验要求。

(2)实验过程中所用的色谱柱为C18反相柱，柱长250mm，内径4.6mm，粒径5μm，购自知名色谱柱供应商。该色谱柱广泛应用于各类生物碱、苷类等复杂化合物的分离，具有较好的柱效和重现性。在使用前，色谱柱需进行活化，活化步骤包括以甲醇、水各冲洗30分钟，然后以正己烷冲洗15分钟，最后用样品溶液冲洗5分钟。活化后的色谱柱可保证实验结果的稳定性和重复性。

(3)实验操作过程中，所有使用过的玻璃仪器均需经过严格的清洗和干燥处理。玻璃仪器采用去离子水冲洗后，使用去离子水浸泡24小时，然后用洗洁精和去离子水交替清洗，再用去离子水冲洗干净。干燥后的玻璃仪器采用旋转蒸发仪在50℃下烘干1小时，确保无水分残留。此外，实验过程中还使用了定量移液器、微量注射器、样品瓶、试管等实验器具，这些器具均需确保无污染，以免影响实验结果的准确性。例如，在进行样品溶液制备时，使用定量移液器准确量取溶剂，确保样品浓度的精确控制。

1.2仪器与试剂

(1)本实验所使用的仪器包括高效液相色谱仪（HPLC）一台，型号为Agilent1260Infinity，配备紫外检测器（UV）和自动进样器。该仪器具备高效分离、快速检测的特点，适用于复杂样品的分离分析。此外，实验中还使用了分析天平一台，型号为SartoriusBP211D，用于准确称量实验样品和试剂。

(2)试剂方面，主要使用了正己烷、甲醇、乙腈等有机溶剂，均购自国内知名化学试剂公司，纯度为分析级。此外，实验中还使用了去离子水，电阻率大于18MΩ·cm，以保证实验结果的准确性。在实验过程中，所有试剂均需新鲜配制，避免长时间存放导致的浓度变化。

(3)实验过程中，还使用了C18反相色谱柱，柱长250mm，内径4.6mm，粒径5μm，购自知名色谱柱供应商。该色谱柱具有优异的分离性能，适用于各类生物碱、苷类等复杂化合物的分离。此外，实验中还使用了旋转蒸发仪、水浴锅、微波消解仪等辅助设备，以确保实验的顺利进行。

1.3芒果苷苷元的制备

(1)芒果苷苷元的制备首先从新鲜芒果中提取总多酚。将新鲜芒果去核后，切成小块，用粉碎机粉碎成均匀的浆状物。随后，将浆状物置于布袋中，用榨汁机提取汁液。汁液通过滤纸过滤，得到澄清的芒果汁。将芒果汁置于旋转蒸发仪中，在50℃下减压浓缩至近干，得到芒果多酚粗提物。

(2)接着，将芒果多酚粗提物用95%乙醇溶液溶解，并通过活性炭脱色处理。活性炭脱色过程中，将溶解好的芒果多酚溶液与活性炭混合，在室温下搅拌30分钟，然后过滤去除活性炭。过滤后的溶液在旋转蒸发仪中减压浓缩，去除乙醇，得到深棕色的浓缩液。浓缩液用热水溶解，再通过D101型大孔树脂柱进行吸附，用不同浓度的乙醇溶液进行梯度洗脱。

(3)洗脱得到的芒果苷苷元溶液经过减压浓缩、冷冻干燥等步骤，得到芒果苷苷元粉末。冷冻干燥过程中，将溶液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后在冷冻干燥仪中干燥至粉末。得到的芒果苷苷元粉末经过复溶于适量甲醇溶液，进行高效液相色谱（HPLC）检测，确定其纯度。最终，将纯度达到98%以上的芒果苷苷元粉末作为实验样品，用于后续的油水分