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G蛋白偶联受体107缺失对HaCaT细胞行为的影响
目录
G蛋白偶联受体107缺失对HaCaT细胞行为的影响（1）．．．．．．．．．．．．．3
内容描述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3
1.1研究背景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3
1.2研究目的．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5
1.3研究方法概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5
G蛋白偶联受体107（GPR107）概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6
2.1GPR107的结构与功能．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8
2.2GPR107在细胞信号传导中的作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9
HaCaT细胞实验研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10
3.1HaCaT细胞培养与处理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11
3.2GPR107敲除细胞的构建与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12
3.3实验分组与处理方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13
GPR107缺失对HaCaT细胞增殖的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15
4.1细胞增殖能力的检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17
4.2GPR107缺失对细胞周期的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18
GPR107缺失对HaCaT细胞迁移和侵袭能力的影响．．．．．．．．．．．．．．19
5.1细胞迁移实验．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20
5.2细胞侵袭实验．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22
5.3结果分析与讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23
GPR107缺失对HaCaT细胞凋亡的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24
6.1细胞凋亡检测方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24
6.2GPR107缺失对细胞凋亡的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26
GPR107缺失对HaCaT细胞代谢的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28
7.1细胞代谢相关指标检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29
7.2GPR107缺失对细胞代谢的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30
GPR107缺失对HaCaT细胞基因表达的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31
8.1基因表达谱分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32
8.2GPR107缺失对关键基因表达的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
G蛋白偶联受体107缺失对HaCaT细胞行为的影响（2）．．．．．．．．．．．．36
一、内容概要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36
二、实验方法与材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38
实验设计．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38
细胞培养与实验分组．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39
（1）正常组细胞培养．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41
（2）G蛋白偶联受体107缺失组细胞构建及培养．．．．．．．．．．．．．．．．．42
实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42
（1）细胞行为观察．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44
（2）细胞功能检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45
（3）分子生物学技术验证．．．．．．
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