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第六章
诊断酶学;教学目标与要求;主要内容;第一节酶学概述
一、酶的概念、结构及功能
(一)基本概念;(二)酶的结构及功能;二、酶的命名、分类及编号
临床上常用的酶;第二节血清酶
一、血清酶的来源;二、血清酶的去路;三、血清酶的生理变异;四、血清酶变化的病理机制
(一)血清酶变化机制;(二)血清酶变化的病理机制;第三节酶活性测定
(一)米-曼公式;(二)Km与Vmax;(三)影响酶促反应的因素
1.底物浓度对酶促反应的影响;2.酶浓度当底物浓度远远大于酶浓度时,酶促反应速率与酶的浓度成正比。在病理情况下,样品酶浓度很高,此时可因底物过早而且过多地被消耗,而影响酶活性测定,故需用生理盐水或其他缓冲液进行适当的稀释。但需注意稀释对测定结果的影响。
3.缓冲液的种类、离子强度和pH根据对酶活性的影响不同可将缓冲溶液分为活性、抑制、惰性三类。各种体液样品也是缓冲液,应严格掌握测定样品与底物的用量比例,样品在总体积中所占的比例应不超过10%。
4.温度测定酶活性时所用温度的误差应严格控制在±0.1℃。
5.激活剂与抑制剂
在进行酶偶联法测定酶活性时,反应体系中还必须加入指示酶甚至辅助酶,对其浓度等条件也应考虑。同时反应时间及产物对酶促反应也有影响。;三、酶活性浓度的测定
(一)酶活性浓度测定方法;1.定时法(固定时间法);2.连续监测法;(二)酶偶联测定法
1.???酶偶联反应;2.酶偶联反应原理;酶偶联法测定ALT的吸光度变化图;3.对酶偶联反应的要求;(三)血清酶活性浓度测定条件的选择;四、酶活性浓度的单位
(一)酶活性单位;(二)酶活性浓度单位;五、酶的免疫化学测定;第四节同工酶及亚型的测定
一、同工酶的概念及分类;二、同工酶的分析方法;?(一)电泳法;血清LD同工酶琼脂糖凝胶电泳图谱;(二)色谱法;(三)免疫化学法;(四)动力学分析法;(五)蛋白酶水解法;第五节
常用血清酶及其同工酶测定和应用;?一、转氨酶及其同工酶
(一)生化特性与组织分布;(二)临床意义;二、碱性磷酸酶及其同工酶
(一)生化特性与组织分布;(二)测定方法与临床意义;三、?-谷氨酰转移酶及其同工酶
(一)生化特性与组织分布;(二)测定方法与临床意义;四、单胺氧化酶
(一)生化特性与组织分布;(二)测定方法与临床意义;五、肌酸激酶及其同工酶
(一)生化特性与组织分布;(二)测定方法与临床意义;六、乳酸脱氢酶及其同工酶
(一)生化特性与组织分布;(二)测定方法与临床意义;表5-7AMI时血清酶学变化;AMI时心肌酶时相变化;七、酸性磷酸酶及其同工酶
(一)生化特性与组织分布;(二)测定方法与临床意义;八、淀粉酶及其同工酶
(一)生化特性与组织分布;(二)测定方法与临床意义;九、脂肪酶测定;十、胆碱酯酶(cholinesterase,ChE);十一、酶学检测项目的选择及应用;底物浓度与Km比值相当的最大反应百分比;酶偶联反应;测定最大反应速度与初速度;指示酶、辅助酶的浓度计算方法一;指示酶、辅助酶的浓度计算方法二;辅因子、活化剂的种类和浓度;温度的控制;常见酶温度转化系数;连续监测法中常数K的意义和设置;连续监测法中常数K值的检验;思考题;9、春去春又回,新桃换旧符。在那桃花盛开的地方,在这醉人芬芳的季节,愿你生活像春天一样阳光,心情像桃花一样美丽,日子像桃子一样甜蜜。10月-2010月-20Sunday,October11,2020
10、人的志向通常和他们的能力成正比例。10:58:3710:58:3710:5810/11/202010:58:37AM
11、夫学须志也,才须学也,非学无以广才,非志无以成学。10月-2010:58:3710:58Oct-2011-Oct-20
12、越是无能的人,越喜欢挑剔别人的错儿。10:58:3710:58:3710:58Sunday,October11,2020
13、志不立,天下无可成之事。10月-2010月-2010:58:3710:58:37October11,2020
14、ThankyouverymuchfortakingmewithyouonthatsplendidoutingtoLondon.ItwasthefirsttimethatIhadseentheToweroranyoftheotherfamoussights.IfIdgonealone,Icouldnthaveseennearlyasmuch,becauseI
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本人在医药行业摸爬滚打10年,做过实验室QC,仪器公司售后技术支持工程师,擅长解答实验室仪器问题,现为一家制药企业仪器管理。
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