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基因克隆技术;课程概述;第一章:基因克隆技术简介;什么是基因克隆?;基因克隆的基本原理;基因克隆的应用领域;第二章:基因克隆的工具;限制性内切酶;DNA连接酶;载体系统;宿主细胞;第三章:基因克隆的基本步骤;目的基因的获取;载体的选择与制备;DNA片段的插入;重组DNA分子的导入;重组克隆的筛选;第四章:PCR技术在基因克隆中的应用;PCR原理及流程;PCR引物设计;PCR产物的克隆;第五章:cDNA文库的构建;cDNA合成原理;cDNA文库构建步骤;cDNA文库的筛选方法;第六章:基因组文库的构建;基因组DNA的制备;基因组文库构建步骤;基因组文库的筛选方法;第七章:表达载体的构建;原核表达系统;真核表达系统;表达载体的设计要点;第八章:重组蛋白的表达与纯化;重组蛋白表达的影响因素;诱导表达策略;重组蛋白的纯化方法;第九章:基因克隆技术的高级应用;定点突变技术;基因敲除技术;基因敲入技术;CRISPR/Cas9基因编辑技术;第十章:基因克隆在医学研究中的应用;疾病相关基因的克隆与鉴定;基因治疗;重组蛋白药物的生产;第十一章:基因克隆在农业中的应用;转基因作物的开发;抗虫棉案例分析;抗除草剂大豆案例分析;第十二章:基因克隆在工业生产中的应用;工业酶的生产;生物燃料的开发;生物塑料的制造;第十三章:基因克隆技术的伦理问题;基因克隆技术的潜在风险;转基因生物的安全性评估;基因克隆技术的法律法规;未来展望;总结与讨论
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