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TGDSF0003-2023 罗非鱼无乳链球菌和海豚链球菌双重荧光PCR检测方法.pdf

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ICS65.150

CCSB50

GDSF

广东水产学会团体标准

T/GDSF0003—2023

罗非鱼无乳链球菌和海豚链球菌双重荧光

PCR检测方法

DuplexReal-timePCRMethodfortheDetectionofStreptococcusagalactiaeand

StreptococcusiniaeinTilapia

2023-9-4发布2023-9-5实施

广东水产学会发布

T/GDSF0003—2023

目次

前言III

1范围1

2规范性引用文件1

3术语和定义1

4缩略语1

5试剂和耗材1

试剂1

引物和探针1

6仪器设备2

7样品采集与处理2

样品采集2

7.1.1采样工具2

7.1.2待检样本2

7.1.3样品运输2

样品前处理2

7.2.1池塘水样品前处理2

7.2.2环境拭子前处理2

7.2.3细菌培养物2

7.2.4组织样品前处理2

8操作方法2

DNA提取3

反应体系的配制3

加样3

荧光PCR反应3

8.4.1上机3

8.4.2循环条件设置3

8.4.3荧光通道设定3

9结果判定3

阈值设定3

质控标准3

结果描述及判定3

附录A(规范性)溶液配置5

A.10.01mol/LPBS(pH7.2)溶液的配置5

A.2阳性对照5

A.3阴性对照5

附录B(规范性)引物、探针的名称、序列和工作浓度6

I

T/GDSF0003—2023

B.1引物、探针的名称、序列和工作浓度6

附录C(规范性)DNA提取试剂盒方法7

C.1DNA提取方法7

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