谷子SiCBL及SiCIPK与钾离子通道SiAKT1的互作及调控研究.pdf

中文摘要

钾是植物中重要的营养元素之一，参与植物生长发育的过程中的多种生理活动，

植物主要通过根系从土壤中以离子形式吸收钾。Shaker钾离子通道家族成员在植物

钾吸收过程中发挥关键作用，AKT1作为Shaker钾离子通道蛋白，在拟南芥中的钾

吸收活性受AtCBL1/9及AtCIPK23调控。谷子（Setariaitalica）是一种耐旱耐贫瘠

的作物，研究谷子的钾吸收机制对揭示谷子的胁迫抗性机制具有重要意义。本论文主

要围绕SiCBL及SiCIPK对SiAKT1的调控机制进行研究。

在本实验组前期研究中，初步筛选发现谷子中有10个Shaker家族钾通道基因，

其中Seita.5G244400具有钾吸收活性，与拟南芥AtAKT1同源，命名为SiAKT1。通

过比较谷子及拟南芥CBL及CIPK家族基因发现SiCBL7与AtCBL1/AtCBL9亲缘关

系接近，SiCIPK3、SiCIPK20、SiCIPK33、SiCIPK34与AtCIPK23亲缘关系接近。

生物信息学分析与不同处理下谷子qRT-PCR实验结果显示，SiAKT1及部分

SiCBL基因响应多种非生物胁迫，且在不同时间下表达趋势不同，其中，SiCBL7与

SiAKT1表达趋势较为一致，推测SiCBL7是SiAKT1的候选调控蛋白。进一步通过

mbSUS实验发现，SiAKT1与SiCBL2、SiCBL4、SiCBL6、SiCBL7及SiCIPK3存在

相互作用；与SiAKT1存在相互作用的SiCBL蛋白与SiCIPK20、SiCIPK33、SiCIPK34

存在相互作用。

本论文进一步利用双电极电压钳系统在爪蟾卵母细胞中开展电生理实验。单独

表达SiCBL或SiCIPK，无钾电流；单独表达SiAKT1钾内流活性较弱；共表达SiAKT1、

SiCBL2及SiCIPK3无法增强SiAKT1的钾通道活性；而共表达SiAKT1、SiCBL7及

SiCIPK20后可以记录到较强的内向钾电流，表明SiCBL7-SiCIPK20可以激活SiAKT1

的钾通道活性。

本论文研究结果表明，谷子中钾离子通道SiAKT1具有钾通道活性，SiAKT1的

钾通道活性受上游SiCBL7-SiCIPK20的调控。这些研究结果初步揭示了谷子的钾吸

收调控机制，为提高谷子钾吸收效率及谷子的胁迫抗性提供了理论基础。

关键词：谷子；SiAKT1；SiCBL；SiCIPK；电生理

Ⅰ

目录

中文摘要I

ABSTRACTIII

1绪论1

1.1谷子1

1.2植物钾吸收机制1

1.3钾离子通道研究进展2

1.3.1Shaker家族钾离子通道2

1.3.2TPK家族钾离子通道4

1.3.3Kir-like家族钾离子通道5

1.3.4谷子中钾离子通道的研究进展5

1.4钾离子通道的调控机制6

1.4.1转录水平调控6

1.4.2翻译后水平的调控6

1.5植物中的植物CBL-CIPK调控网络8

1.5.1CBL钙感受器蛋白家族8

1.5.2CIPK蛋白激酶家族9

1.5.3CBL-CIPK信号网络11

1.6电生理技术13

1.7研究内容及意义14

2谷子SiAKT1与SiCBL/SiCIPK基因生物信息学分析17

2.1实验方法17

2.1.1AKT1序列比对17

2.1.2CBL及CIPK进化树的构建17