TWJWCHCA 001-2024 基于多重PCR 的呼吸道感染病原体靶向二代测序检测技术规范.docx

ICS11.020

CCSC50

/WJWCHCA

中国医药卫生文化协会团体标准

T/WJWCHCA001—2024

基于多重PCR的呼吸道感染病原体靶向二代测序检测技术规范

Technicalspecificationfortargetednext-generationsequencingdetectionofrespiratoryinfectionpathogensbasedonmultiplexPCR

（发布稿）

2024-12-02发布 2024-12-02实施

中国医药卫生文化协会??发布

T/WJWCHCA001—2024

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目 次

前言 II

引言 III

范围 1

规范性引用文件 1

术语和定义 1

缩略语 2

技术应用 3

实验原理 6

实验室分区、仪器设备及试剂 6

性能验证或性能确认 7

分析前 9

分析中 10

分析后 11

质量控制 12

附录A（资料性） 呼吸道感染病原体靶向二代测序申请单模板 14

附录B（资料性） 呼吸道感染病原体靶向二代测序检测报告模板 15

参考文献 16

前 言

本标准参照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起

草。

请注意本标准的某些内容可能涉及专利。本标准的发布机构不承担识别专利的责任。本标准由中国医药卫生文化协会提出并归口。

本标准起草单位：广州金域医学检验集团股份有限公司、北京友谊医院、中南大学湘雅二医院、长

沙金域医学检验实验室有限公司、武汉儿童医院、重庆医科大学附属第二医院、江苏省人民医院、广州医科大学附属第一医院、广州金域医学检验中心有限公司、广州国家实验室、广东省呼吸与健康学会。

本标准主要起草人：余艳、赵晓涛、胡敏、李培、陆小霞、胡鹏、张磊、姚欣、关文达、李慧源、梁萍、马常钧。

引 言

随着新发和再发病原体的不断涌现、耐药性问题日益严重以及免疫功能低下人群的增加，感染性疾病仍是威胁人类健康的主要疾病之一。其中，呼吸道感染是临床上最常见的感染性疾病，可分为上呼吸道感染和下呼吸道感染。病原学的快速检测和准确诊断是感染性疾病有效治疗的重要前提。传统的病原学检测手段主要包括显微镜检查、培养、血清学试验、传统分子生物学方法（如PCR）等，但这些方法存在诸多局限性。近年来，分子诊断技术，特别是二代测序（next-generationsequencing，NGS）技术的迅猛发展，极大推动了感染性疾病的精准诊治。

靶向二代测序（targetednext-generationsequencing，tNGS）是一种基于多重PCR特异扩增或探针捕获等方法富集后，检测标本中特定靶标核酸的技术。在病原学检测领域，tNGS技术能够一次性检测标本中特定的几十至几千上万种特定病原体及其毒力基因和/或耐药基因。与直接从临床标本中提取核酸进行测序分析、一次性覆盖检测病毒、细菌、真菌和寄生虫等多种病原体的宏基因组二代测序

（metagenomicnext-generationsequencing，mNGS）相比，tNGS具有灵敏度受宿主核酸影响较小、性价比高等特点。

目前，市场上已有众多医疗机构提供病原体tNGS检测服务，不同机构的术语定义、检测流程和检测性能等均存在差异，给报告单解读和临床应用带来了不小的挑战。目前尚未有相关的政策或标准来规范检测流程，因此迫切需要制订规范的技术要求及标准。鉴于此，国内多位具有丰富临床、检验和产业经验的专家学者共同参与，参考国内外相关标准、指南与专家共识，结合tNGS检测技术特点，就病原体tNGS技术要求和操作规范达成共识，指导和规范tNGS在呼吸道感染病原体检测中的应用。

T/WJWCHCA001—2024

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基于多重PCR的呼吸道感染病原体靶向二代测序检测技术规范

范围

本标准规定了采用基于多重PCR的靶向二代测序技术进行呼吸道临床标本病原体检测（包括分析前、分析中和分析后）的方法和程序，以及性能验证或性能确认和质量控制等。

本标准适用于采用基于多重PCR的靶向二代测序技术进行呼吸道临床标本病原体检测的医疗机构。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本标准必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本标准；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适