DB36_T 1527-2021 常见作物寄生线虫形态学鉴定方法.docx

ICS67.040

B16

DB36

江西省地方标准

DB36/T1527—2021

常见作物寄生线虫形态学鉴定方法

Morphologicalidentificationmethodsofparasiticnematodesincommoncrops

2021-12-14发布2022-06-01实施

江西省市场监督管理局发布

I

DB36/T1527—2021

目次

前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4主要设备 1

5样品采集与分离 1

6鉴定方法 2

7结果判定 2

附录A（资料性）20属常见作物寄生线虫的主要寄主、常见种及为害症状 3

附录B（规范性）20属常见作物寄生线虫形态学特征 7

附录C（资料性）19属常见作物寄生线虫形态特征图 11

II

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前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由江西省农业农村厅提出并归口。

本文件起草单位：江西省农业科学院农业应用微生物研究所、吉安市农业科学研究所、吉安市永丰县蔬菜产业发展中心、吉安市泰和县塘洲镇人民政府。

本文件主要起草人：范琳娟、徐雪亮、刘子荣、喻吉生、涂年生、康宏波、胡平华、姚英娟。

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1

常见作物寄生线虫形态学鉴定方法

1范围

本文件规定了常见作物上包括垫刃目、滑刃目、矛线目、三矛目等4个目20属寄生线虫有关的样品采集与分离、形态学鉴定方法和结果判定。

本文件适用于常见作物的4个目20属寄生线虫形态学鉴定。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4主要设备

生物显微镜、离心机、解剖镜。

5样品采集与分离

5.1采集

主要检查植物材料地上部分叶片颜色、株高、茎粗等生长指标是否异常，根部是否有根结、褐化或发黑等症状，收集上述可疑材料及根际土壤带回实验室检验。具体采样特征见附录A。

5.2分离

5.2.1要求

将植物材料轻轻冲洗干净后，于吸水纸上吸掉表面水后，然后用刀片切成约0.5mm厚的薄片用贝尔曼漏斗法或浅盘法分离线虫。将分离获得的线虫液通过沉淀或离心浓缩后，制成临时玻片，于10×40倍下进行镜检，观察线虫的形态学特征。

5.2.2贝尔曼漏斗法

在口径为20cm的漏斗末端接一段橡皮管，在橡皮管末端用弹簧夹夹紧，在漏斗上方放置一层纱布和一层线虫滤纸，将土样或者切碎的植物材料均匀铺在滤纸上，缓慢加水至浸没样品，室温下放置48h后，打开夹子，收集橡皮管里的水样，于解剖镜下观察是否有线虫。若有线虫，将水样摇匀后，吸取100μL或200μL线虫液，制成临时玻片，进行镜检鉴定。

5.2.3浅盘法

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2

把网眼筐套放在塑料盆中，在网眼筐里放入一层纱布和一张等大的清风牌双层面巾纸。将土样或者切碎的植物材料轻轻倒在面巾纸上平摊开，用量杯轻轻地沿塑料盆壁往盆里加水直至水没过土面2mm。静置48h后，轻轻取出带土的网眼盆，把塑料盆中的水样(即线虫悬浮液)倒入500mL量杯中，再用少量(约20mL)清水冲洗塑料盆，重复清洗2次，冲洗液继续倒入500mL量杯中。量杯中的线虫液静置3h后，用橡皮管吸去上清液，留下约100mL，摇匀后倒入平底管中，并用5mL清水冲洗，重复清洗2次量杯，将附着在杯壁、杯底的线虫冲洗入平底管中。静置3h，用橡皮管轻轻吸取上层水留下约20mL，摇匀后倒入有刻度的试管中，再用少量清水沖洗平底管2次，冲洗液继续倒入有刻度试管中。静置3h或离心去上清后摇匀后制成临时玻片，进行镜检鉴定。

6鉴定方法

6.1鉴定依据

根据不同目、科、属线虫体形、唇区、口针、口针基部球、食道类型、背食道腺开口位置、中食道球大小及形状、侧尾腺口形状、生殖器官位置及特征、尾部形状及特征等主要形态特征进行鉴定。

6.2鉴定特征

垫刃目包括15个属，分别为垫刃线虫属(Tylenchus)、茎线虫属(Ditylenchus)、粒线虫属（Anguina）、矮化