TYNZYC 0122-2024 绿色药材 仙茅组培苗生产技术规程.docxVIP

ICS66.020.20

CCSB00/09

YNZYC

云南省中药材种植养殖行业协会团体标准

T/YNZYC0122—2024

绿色药材仙茅组培苗生产技术规程

GreenMedicinalMaterials TechnicalregulationsfortheproductionoftissuecultureseedlingofCurculigoorchioides

2024-03-29发布 2024-03-29实施

云南省中药材种植养殖行业协会??发布

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前 言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容有可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由云南省中药材种植养殖行业协会提出并归口。

本文件起草单位：云南省农业科学院药用植物研究所、云南昊晨农业有限公司、云南植虫药生物科技有限公司。

本文件主要起草人：起明菊、杨美权、张金渝、曾祥飞、杨维泽、杨天梅、左应梅、赵露琴、许宗亮、王丽、李纪潮、朱新焰。

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绿色药材仙茅组培苗生产技术规程

范围

本文件规定了仙茅组培苗培养准备、外植体采集和处理、组织培养、驯化、包装、标识和运输。本文件适用于云南省仙茅组培苗的生产。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

NY/T496肥料合理使用准则 通则NY/T2306花卉种苗组培快繁技术规程

术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

组织培养

利用植物细胞的全能性，采集仙茅幼嫩叶，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整仙茅植株。

外植体

从健壮鲜活植物体上获取的用于植物组织培养的组织或器官。

驯化

组培苗从人工控制的培养条件到自然适应的过渡过程。

培养准备

生产场地与设备

应符合“NY/T2306”的规定要求。

接种室消毒

按照每15m2配置1根30w紫外灯的标准，每天用紫外灯照射杀菌1h,每周用臭氧发生器消毒2次～3次，臭氧浓度≥20mg/m3,时间≥30min。

培养基配制

以MS培养基为基本培养基，添加琼脂4.0g/L～4.5g/L，蔗糖30g/L，调节pH值为5.8，激素和添加物配方见附录A。

培养基消毒

分装并密封好的培养基放入121℃下高压灭菌20min，自然冷却至压力表指针降至0时，开锅取出备用。

外植体的采集和处理

外植体选择

取生长旺盛，无病虫害的植株。

采集时间

4月～6月，用75%多菌灵粉剂500倍液喷施植株，每隔3d喷施一次，连续喷施5次。

采集方法

取幼嫩叶，采集后加标签，标明母株编号、采集地点、采集时间等。若叶片30min内不能处理，则需装入自封袋中，排除空气后密封保存；若需长途运输2d～3d,需冷藏保存。

表面清洁

用肥皂液清洗10min～15min，滴加3滴～4滴吐温-80振摇10min～15min，置于自来水下冲洗50min～70min。

消毒

外植体消毒按以下步骤进行：

a在超净工作台上，用75%酒精消毒10s～15s，无菌水冲洗2次～3次。b用饱和漂白粉溶液消毒20min～30min，无菌水冲洗4次～5次。

c用0.05%升汞溶液消毒10min～15min，无菌水冲洗8次～9次。

消毒废液的处理

使用过的氯化汞溶液按照国家有关剧毒化学品使用的法规进行回收处理。

组织培养

初代培养

将消毒好的仙茅叶片，剪去接触消毒液的伤口，剪成长约0.5cm～1.0cm的小段，将剪好材料平铺于培养基中，接种材料与培养基充分接触，分布均匀，接种完毕立即盖好瓶盖并作好标记，注明材料名称、接种日期等事项，先暗培养20d～30d再转光培养30d～40d，形成增殖苗。

增殖培养

取诱导或继代获得丛生芽，将丛生芽剪成单芽，将单芽从基部剪成叶片和茎段。茎段基部接种于继代培养基中，叶片剪成长约0.5cm～1cm的小段，平铺于继代培养基中，转接周期为50d～60d。

生根培养

将增殖的丛芽切割成单个完整的幼芽，按极性接种于生根培养基中，培养50d～60d可炼苗。

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