大鼠实验性脊髓损伤后切开减压与硬模重建研究1.pptVIP

大鼠实验性脊髓损伤后切开减压与硬模重建研究一、研究背景、概况及意义1.背景及概况：大家都知道，在日常生活中受伤的案例经常看见，伤到脑脊髓的人并不少，后果严重。目前脑脊髓损伤后的保护和修复方面的研究取得了令人瞩目的成果。慢性脊髓压迫性疾病是神经系统常见疾患，如肿瘤和各种原因所致的椎管狭窄，是一组具有占位性特征的椎管内病变。脊髓损伤（spinalcordinjury,SCI）是一种严重的继发于高能量创伤的中枢神经系统疾患，其病理改变包括轴突的断裂、髓鞘的崩解以及神经细胞的坏死和凋亡。造成损伤的原因有外伤性和非外伤性。外伤性损伤是受到机械外力作用包括直接或间接的外力作用而造成脊髓结构与功能的损害，为急性损伤；而非外伤性的损害则多为肿瘤、结核、椎管畸形等原因所造成，为慢性损伤。慢性脊髓损伤在致病因素去除后其神经功能可以获得一定程度的恢复，神经系统本身具有一定的自我恢复能力。近年来有关人脊髓损伤的研究受到关注.神经细胞黏附分子（neuralcelladhesionmolecule,NCAM）是细胞表面的一种糖蛋白，在神经系统发育过程中与轴突生长延伸，突触结构的维持，模式重建以及神经元的出芽有着密切关系，是中枢神经系统功能修复的标志物。我们采用免疫组织化学SABC法对脊髓渐进性压迫损伤修复过程中NCAM的表达进行了研究，为从分子水平阐明NCAM与慢性压迫性脊髓损伤后神经修复的机制，为寻找有效的治疗方法提供新的思路。我们设计了大鼠实验性脊髓损伤后切开减压与硬模重建模型，应用免疫组织化学方法检测了不同程度慢性压迫性脊髓损伤后及减压后模型的重建及其受体表达的变化规律。建立大鼠实验性脊髓损伤后切开减压与硬模重建的模型，同时也要修复脊与运动的功能，这是为以后的观察这个脊髓损伤后切开减压与硬模后期奠定基础。2选题意义（1）理论意义：利用大鼠实验性脊髓损伤后切开减压与硬模重建这个实验来验证已经产生的一些理论和为证实的理论，加强自身脑海中的一些观念。（2）现实意义：脊髓损伤(SpinalCordInjury,SCI)是一种严重威胁人类健康及生存质量的疾病,也是骨科和神经外科常见的外伤之一。脊髓损伤早期缺血缺氧引起的继发性损害常导致严重后果,临床针刺治疗可改善症状。本次实验的现实意义是以大鼠作为实验的对象产生对我们有用的实验记录和数据，为以后的医疗事业做出一定的贡献，更好的为人们服务。二、研究主要内容1.本研究的基本思路是：（1）通过文献阅读与资料查找，明确“脊髓损伤”概念，知道大鼠脊髓的相关原理。（2）明确“硬模重建”概念，知道硬模重建的相关理论。（3）结合书本的理论知识以及现实的实际状况，进行试验。三、方法及措施本文将采用文献研究、实证分析两种方法。1.文献研究：先对己有的营销学理论相关文献进行系统的学习和阅读。归纳整理营销学的相关理论，重点整理前人关于“营销模式”与“核心力营销模式”的研究。2.实证分析：设计试验研究的方案，进一步论证试验试想四、研究的主要实验步骤1、材料准备健康清洁的成年大鼠75只，体重280~320克，平均300克。随机取6只作为对照组，3只假手术组。30只制作成脊髓打击伤动物模型，随机分成5组，分别于伤后1、3、5、7、10天处死教材，每组每时相点6只。36只制作成脊髓慢性压迫性中度损伤模型，减压后随机分为5组，分别于减压后1、3、5、7、14、28天后处死取材。2、制作脊髓损伤动物模型。将大鼠用10%水合氯醛腹腔注射麻醉，俯卧位固定，背部剃毛，常规碘酒、酒精消毒，铺无菌巾，取以T10为中心的后正切口，长约1.5厘米，切开皮肤、皮下组织，分离椎旁的肌肉，线路椎板，与大鼠脊髓弧度保持一致的圆形金属垫片，将玻璃管垂直放置于与垫片相对的椎板上方，二者不接触，以防压迫脊髓，造成损伤。3、行为学检查分别于伤后1、3、5、7、10、14、28天后处死钱改良评分、斜板试验，对大鼠进行行为以及肢体运动功能检测，观察伤后各时相点大鼠后肢的活动、肢力等，以此评定不同时间点大鼠运动功能的恢复情况。4、病理标本收集在预订时间点用10%水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠，仰卧位固定，胸腹部剃毛，常规碘酒、酒精消毒。取前正中切口，切开皮肤、皮下组织，打开胸腔，于主动脉根部放置一根医用4号缝线，剪开左心室置管于主动脉升部，用丝线结扎固定，剪开右心耳，用0.1M磷酸盐缓冲液快速洗至组织变白，然后用多聚甲醛灌注固定。半小时后取自损伤边缘至远、近端各5毫米两端脊髓组织；正常对照组大鼠则择时取相应阶段脊髓，并在此前行行为学检查。标本取出后随机用多聚甲醛磷酸盐缓冲液固定，72小时后石蜡包埋，连续切片，切片厚度5米，以备免疫组织化学染色。5、NCAM的免疫组织化学检