DB35_T 2024-2021 鳗鲡疱疹病毒感染诊断技术规范.docxVIP

ICS11.220CCSB41

35

福建省地方标准

DB35/T2024—2021

鳗鲡疱疹病毒感染诊断技术规范

ProtocolofdiagnosistechnologyforHerpesvirusanguillaeinfection

2021-11-23发布2022-02-23实施

福建省市场监督管理局发布

I

DB35/T2024—2021

目次

前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4缩略语 1

5主要试剂和材料 1

6主要仪器和设备 2

7临床诊断 2

8实验室分子诊断 2

9综合判定 3

附录A（资料性）试剂配制 4

附录B（资料性）鳗鲡疱疹病毒阳性参考序列 6

DB35/T2024—2021

II

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由福建省农业科学院提出。

本文件由福建省海洋与渔业局归口。

本文件起草单位：福建省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所、福建省农业科学院生物技术研究所、福州海关技术中心、清流县畜牧兽医水产中心。

本文件主要起草人：饶秋华、葛均青、张志灯、罗土炎、黄文华、杨金先、刘洋、何肖云、陈强、宋铁英、罗钦、黄薇。

DB35/T2024—2021

1

鳗鲡疱疹病毒感染诊断技术规范

1范围

本文件规定了日本鳗鲡（Anguillajaponica）、欧洲鳗鲡（A.anguilla）、美洲鳗鲡（A.rostrata）、花鳗鲡（A.marmorata）及太平洋双色鳗鲡（A.bicolorpacifica）的鳗鲡疱疹病毒感染诊断技术。

本文件适用于鳗鲡疱疹病毒感染的诊断。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

CTAB：十六烷基三甲基溴化铵（Cetyltrithylammoniumbromide）

dATP：脱氧腺苷三磷酸（Deoxyadenosinetriphosphate）

dCTP：脱氧胞苷三磷酸（Deoxycytidinetriphosphate）

dGTP：脱氧鸟苷三磷酸（Deoxyguanosinetriphosphate）

DNA：脱氧核糖核酸（Deoxyribonucleicacid）

dNTP：脱氧核糖核苷三磷酸（Deoxy-ribonucleosidetriphosphate）

dTTP：脱氧胸苷三磷酸（Deoxythymidinetriphosphate）

EB：溴化乙啶（Ethidiumbromide）

EDTA：乙二胺四乙酸（Ethylenediaminetetraaceticacid）

HVA：鳗鲡疱疹病毒（Herpesvirusanguillae）

PCR：聚合酶链式反应（Polymerasechainreaction）

Taq酶：DNA聚合酶（ThermusAquaticusDNAPolymerase）

TBE：三羟甲基氨基甲烷-硼酸-乙二胺四乙酸（Tris-borate-EDTA）

Tris：三羟甲基氨基甲烷（Trishydroxymethylaminomethane）

5主要试剂和材料

5.1水：应符合GB/T6682中一级水的规定。

5.2Taq酶：2U/μL，-20℃保存。

2

DB35/T2024—2021

5.3dNTP：dCTP、dGTP、dATP、dTTP，浓度为2.5mmol/L。

5.4引物：上游引物HVA-F：5,-GTGTCGGGCCTTTGTGGTGA-3,，下游引物HVA-R：

5,-CATGCCGGGAGTCTTTTTGAT-3,，引物浓度为10μmol/L。

5.5琼脂糖：电泳级。

6主要仪器和设备

6.1恒温培养箱：温度误差±2℃。

6.2