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PCR扩增DNA的原理和操作
1923年,班廷以动物胰脏为原料制得了高纯度牛胰岛素。1982年,第一例基因工程产品——重组人胰岛素正式上市。1965年,我国在国际上首次人工合成牛胰岛素结晶。资料胰岛素的研制历程
DNA的提取与鉴定限制性内切核酸酶聚合酶链式反应任务一:认识PCR扩增DNA的原理口腔细胞人胰岛素基因DNA如何获取人胰岛素基因?
DNA半保留复制原理体外操作环境对目的基因进行大量复制目的特异、高效、准确优点PCR简称聚合酶链式反应美国科学家穆里斯等发明1993获诺贝尔奖任务一:认识PCR扩增DNA的原理
15-30个碱基长度的单链核酸分子子链延伸子链延伸-5’3’-引物5’--3’引物目的基因任务一:认识PCR扩增DNA的原理引物与目的基因两条链的上下游进行碱基互补配对问题1:PCR过程是如何精准控制只复制目的基因的呢?
任务一:认识PCR扩增DNA的原理问题2:PCR过程中,是如何解旋和合成子链的呢?阅读教材78-79页,自主学习PCR过程,并把PCR关键过程整理在学案上。
耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)4种dNTP引物待扩增的DNA片段(模板)5’5’变性退火聚合温度上升到约95℃,双链DNA解旋为单链。温度下降到约55~68℃,两个引物通过与两条单链DNA结合。温度上升到75℃左右,合成新的DNA链。任务一:认识PCR扩增DNA的原理
5’3’5’5’第一次循环第二次循环3’5’第三次循环3’3’任务一:认识PCR扩增DNA的原理
DNA复制PCR相同点原则条件不同点条件解旋方式结果任务一:认识PCR扩增DNA的原理归纳、整理PCR与DNA复制的异同点
任务一:认识PCR扩增DNA的原理归纳、整理PCR与DNA复制的异同点
NCBI数据库网址:/查询基因序列上游引物:5‘-GCCATCAAGCAGGTCTGTTCC-3’下游引物:5‘-GGTTCAAGGGCTTTATTCCATCTC-3’任务二:进行PCR扩增DNA的实验操作设计引物的一般程序:PrimePtemier5.0软件设计引物
任务二:进行PCR扩增DNA的实验操作DNA测序仪凝胶电泳人胰岛素基因PCR扩增电泳结果A人胰岛素基因PCR产物MDNAmarker测序检测PCR结果的方法基因序列比对(NCBI数据库)
PCR技术的应用基因克隆古生物学研究亲子关系鉴定、刑侦破案病原体的检测(核酸检测)遗传病诊断癌基因的检测和诊断任务三:归纳PCR技术在生产生活中的应用。阅读资料,归纳PCR技术可用于哪些方面。
小结PCR扩增DNA的原理PCR扩增DNA的实验操作PCR技术在生产生活中的应用
自我评价评价内容达成情况(A.非常满意B.满意C.还需努力)实验原理积极思考并回答问题自主阅读并整理归纳PCR过程比较、归纳DNA复制和PCR的异同点实验操作按顺序添加PCR体系的各种成分规范使用移液器加样正确设定PCR扩增仪相关参数实验心得本实验中,你认为实验成功的关键点是什么?你有哪些收获,还有哪些疑问?根据以下评价量表进行自我评价。
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