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生物医药实验技术操作手册
第一章实验室基本安全操作
1.1实验室安全规则
实验室安全规则是保障实验顺利进行和实验人员安全的重要指导原则。以下为实验室安全规则的主要内容：
进入实验室前，应了解实验室的安全操作规程，并遵守相关规定。
实验室内的电器设备应保证符合安全标准，非专业人员不得私自拆卸或维修。
实验室内禁止吸烟、进食和饮水，禁止将个人物品放置于实验台上。
进行实验操作时，必须穿戴合适的防护装备，如实验服、防护眼镜、手套等。
实验室内的危险化学品应按照规定存放，并采取适当的安全措施。
实验室内禁止携带易燃、易爆物品，如打火机、火柴等。
实验室内的实验设备、试剂及原料应严格按照规定使用，不得擅自改变其用途。
实验室内不得擅自改变实验布局，如需变动应事先向实验室负责人报告。
1.2个人防护装备的使用
个人防护装备（PPE）是预防实验中可能产生的伤害和感染的重要措施。以下为个人防护装备的使用指南：
防护装备
使用场景
使用说明
实验服
防止皮肤直接接触有害物质
选择合适的实验服，保证其覆盖全部暴露部位，并在实验结束后更换或清洁
防护眼镜
保护眼睛免受有害物质喷溅
实验操作时应佩戴防护眼镜，保证其牢固地固定在面部
手套
保护双手免受有害物质腐蚀或感染
根据实验性质选择合适的手套，并保证其完整性，操作结束后进行清洗或废弃
防护口罩
防止吸入有害气体或微粒
根据实验环境选择合适的防护口罩，保证其密封性
1.3急救处理与应急措施
急救处理
切割伤：用无菌纱布或清洁布料覆盖伤口，压迫止血，及时就医。
烧伤：用冷水冲洗受伤部位，以降低温度，并尽快就医。
吸入有害气体：迅速离开现场，吸入新鲜空气，如有必要，给予氧气吸入，并及时就医。
毒物接触：立即脱离接触源，脱去受污染的衣物，用大量清水冲洗接触部位，并及时就医。
应急措施
实验室火灾：立即报告火警，使用灭火器灭火，如火势无法控制，迅速撤离实验室，前往安全区域。
电气：立即断电，隔离受损设备，报告，并采取相应措施进行救援。
化学品泄漏：立即关闭泄漏源，移除可能受影响的物品，使用适当的方法进行清理，并报告。
生物安全事件：遵循实验室生物安全规定，使用适当的方法进行消毒和隔离，并及时报告。
第二章实验室设备和器材
2.1设备的维护与保养
实验室设备的维护与保养是保证实验顺利进行的重要环节。一些基本维护与保养措施：
定期检查：对设备进行定期检查，保证设备运行正常。
清洁保养：使用适当的清洁剂定期清洁设备，避免灰尘和污垢的积累。
润滑保养：对于需要润滑的部件，按照制造商的建议进行润滑。
记录维护：记录设备的维护和保养情况，便于后续追踪。
2.2常用实验器材的使用与清洗
2.2.1常用实验器材的使用
移液器：使用时注意调整到合适的流量，避免滴液。
移液管：使用后应立即清洗，避免交叉污染。
离心机：启动前检查是否平衡，操作时避免离心管脱落。
2.2.2常用实验器材的清洗
移液器：使用后立即用清水冲洗，再用洗涤剂彻底清洗。
移液管：使用后立即用清水冲洗，再用洗涤剂彻底清洗，最后用纯水冲洗。
离心管：使用后立即用清水冲洗，再用洗涤剂彻底清洗，最后用纯水冲洗。
2.3仪器设备的校准与检验
2.3.1校准
仪器设备的校准是保证实验数据准确性的重要步骤。一些基本校准方法：
自校准：部分设备具有自校准功能，按照制造商的指导进行校准。
外校准：对于精度要求较高的设备，应送至专业机构进行校准。
2.3.2检验
仪器设备的检验是保证其正常运行的必要环节。一些基本检验方法：
外观检验：检查设备是否有破损、变形等问题。
功能检验：检查设备各项功能是否正常。
功能检验：按照制造商的检验标准进行功能检验。
仪器名称
校准周期
检验周期
移液器
1年
6个月
离心机
1年
6个月
pH计
1年
3个月
电子天平
1年
3个月
热浴恒温振荡器
1年
6个月
第三章细胞培养技术
3.1细胞培养基本操作
细胞培养基本操作包括细胞接种、培养、观察和记录等步骤。以下为具体操作要点：
细胞接种：将细胞悬液均匀地接种于培养瓶或培养板中，注意避免气泡产生。
培养：将接种后的细胞放入恒温培养箱，维持适宜的温度、湿度和二氧化碳浓度。
观察与记录：定期观察细胞生长状态，记录细胞形态、密度和生长曲线等。
3.2培养基的制备与灭菌
培养基的制备
称取适量的基础培养基粉末，加入去离子水，充分溶解。
根据实验需求，添加血清、抗生素等添加剂。
调整pH值至适宜范围。
培养基的灭菌
将制备好的培养基分装于无菌容器中。
使用高压蒸汽灭菌法，在121℃下灭菌1520分钟。
待培养基冷却至室温后，储存于4℃冰箱备用。
3.3细胞传代与冻存
细胞传代
将培养瓶中的细胞刮下，用含有EDTA的消化液处理，使细胞从瓶壁上脱落。
将消化后的细胞悬液离心
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