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解答题

一．解答题（共25小题）

1．我国科学家经多年研究，筛选出高产紫杉醇的细胞，通过植物细胞培养技术可获得大量紫杉醇，实现

紫杉醇的工厂化生产。为提高红豆杉细胞培养物中紫杉醇的产量，研究人员构建紫杉醇合成关键酶基因

（Bapt基因）的超表达载体，并将其导入红豆杉细胞，其具体流程如下：

（1）Bapt基因的获取：提取红豆杉的mRNA，并通过逆转录得到其cDNA，利用PCR技术以图1中的

cDNA片段为模板扩增Bapt基因，扩增的前提是，需要的引物有

（从A、B、C、D四种引物中选择）。上述过程中，用1个图1所示片段产生2个双链等长的子代Bapt

基因片段至少要经过次循环。

（2）构建Bapt基因的超表达载体并将其导入受体细胞：在超量表达Bapt基因载体的构建中，所用DNA

片段和Ti质粒的酶切位点（注：图中所示限制酶切割后形成的黏性末端各不相同）如图2所示。强启

动子能被识别并结合，驱动基因持续转录。Ti质粒中的T﹣DNA在培育转基因红豆杉

中的作用是。为使DNA片段能定向插入T﹣DNA中，可用PCR技术在DNA

片段的两端添加限制酶识别序列，M、N端添加的序列所对应的限制酶分别是。

（3）构建Bapt基因的超表达载体，需用到相应限制酶和DNA连接酶，其中连接酶作用的底物为图3

中的（填“A”或“B”或“A和B”）。

2．深度睡眠既能提高机体免疫力，也有利于青少年的生长发育。骨生长的部分调节机制如图1所示，其

1

中GHRH表示生长激素释放激素，GH表示生长激素，IGF﹣1表示胰岛素样生长因子1。请据图回答

下列问题：

（1）深度睡眠状态下，下丘脑分泌GHRH，经过血液运输作用于[A]垂体，促进其分泌GH作用于肝脏，

这是调节机制。

（2）GH可促进肝脏合成分泌IGF﹣1。研究表明，GH能促进软（成）骨细胞增殖，IGF﹣1能促进软

（成）骨细胞分化，这说明GH与IGF﹣1在促进个体生长方面具有作用。某人骨折后，体

内GH含量会应激性（上升或下降），有利于骨的愈合。从细胞水平上分析原因

是。

（3）科研人员欲验证“柴胡提取物能改善动物睡眠质量，促进动物生长”，并进行了实验研究（已知药

物X能促进动物深度睡眠）。如表所示，请完善实验设计思路并预测实验结果。

实验操作的目的简单操作过程

动物的选择和驯养选择25日龄的健康状况等相同的小鼠30

只，在适宜温度、湿度等条件下饲养1周；

将小鼠随机均分为A、B、C三组，分别测

量各组小鼠的平均深度睡眠时长、血清中

GH浓度并记录。

配制溶液用纯净水配制柴胡提取物溶液和等量的用

①配制药物X溶液。

对照组处理A组②B组用等量

的纯净水灌胃小鼠，连续20d，并在适宜条

件下饲养。

实验组处理C组每天按体重用等量的用纯净水配制的