基因工程的基本内容.pptxVIP

一基因工程的基本内容主要内容1）基因工程的概念2）基因操作的工具3）基因操作的基本步骤4)基因工程的应用

例如青霉素能产生对人类有用的抗生素——青霉素豆科植物的根瘤菌能够固定空气中的氮气人的胰岛B细胞能分泌胰岛素调节血糖的浓度各种生物间的性状千差万别，为什么？生物体的不同性状是基因特异性表达的结果，

什么叫基因工程？基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。该技术是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。基因工程的概念123

（一）基因工程的概念基因工程的别名操作环境操作对象操作水平基本过程结果基因拼接技术或DNA重组技术生物体外基因DNA分子水平人类需要的基因产物剪切→拼接→导入→表达实质基因重组

基因工程培育抗虫棉的简要过程：（一）基因工程的概念普通棉花(无抗虫特性)苏云金芽孢杆菌提取抗虫基因导入棉花细胞(含抗虫基因)棉花植株(有抗虫特性)

（二）基因操作的工具基因的剪刀——限制性内切酶（简称限制酶）分布：作用特点：结果：举例：限制酶主要在微生物中。特异性，即识别特定核苷酸序列，切割特定切点。产生黏性未端（碱基互补配对）。大肠杆菌的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开

（二）基因操作的工具外源基因(如抗虫基因)怎样才能导入受体细胞(如棉花细胞)？导入过程需要运输工具——运载体。作用一：作为运载工具，将外源基因(抗虫基因)转移到受体细胞(棉花细胞)中去。作用二：利用运载体在受体细胞(棉花细胞)内，对外源基因(抗虫基因)进行大量复制。运载体的作用有哪些？01能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。具多个限制酶切点，以便与外源基因连接。具有某些标记基因，便于进行筛选。如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。作为运载体必须具备哪些条件？02

基因的运载工具——运载体：（二）基因操作的工具常用的运载体主要有两类：1）细菌细胞质的质粒2）噬菌体或某些动植物病毒

质粒是基因工程最常用的运载体。细胞染色体外能够进行自主复制的小型环状DNA分子存在于许多细菌、酵母菌等生物中2、最常用的质粒是大肠杆菌的质粒质粒的特点：5、质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用，但复制只能在宿主细胞内成。

基因的针线——DNA连接酶（二）基因操作的工具DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，即把梯子两边扶手的断口连接起来，这样一个重组的DNA分子就形成了。连接的部位：结果：磷酸二酯键，不是氢键形成重组DNA

将目的基因与用限制性内切酶处理后的运载体混合，处理后会出现几种结果？用DNA连接酶（只考虑两两结合）目的基因与目的基因结合、质粒与质粒结合有三种：目的基因与质粒结合为什么？

导入方法：借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径导入过程：（运载体为质粒，受体细胞为细菌）受体细胞：细菌氯化钙细胞壁的通透性增大重组质粒进入受体细胞目的基因随受体细胞的繁殖而复制

对细胞进行检测和筛选如何判断目的基因是否导入受体细胞?检测：

方法原理1基因探针检测碱基互补配对2检测是否含有抗性基因用同位素标记的一段DNA。可通过DNA分子杂交探测与目的基因序列互补的基因是否存在同位素标记导入时用的运载体上如果有抗性基因（标记基因），就可以通过检测抗性基因的表达来检测，比如运载体PBR322就带有抗四环素基因和抗氨卞青霉素基因要么就等目的基因在受体细胞中表达以后，然后根据特定的性状来区分。3检测是否有相应的RNA出现碱基互补配对因为RNA是DNA的产物

不能，受体细胞必须表现出特定的性状或有相应的蛋白质出现，才能说明目的基因完成了表达。受体细胞导入DNA分子能说明目的基因完成了表达吗？若不能表达，要对抗虫基因再进行修饰。检测：通过特定性状的产生与否来确定目的基因是否表达1性状检测直接观察或者是放到相应的环境培养进行验证2蛋白质类用抗体-抗原的方法检测

目的基因的检测和表达4步骤：5提取目的基因1目的基因与运载体结合2将目的基因导入受体细胞3基因操作的基本步骤6

1．我国科学家在利用基因工程培育抗虫棉的过程中，经提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞这三个步骤后，在全部受体细胞中，能够摄入抗虫基因的受体细胞占A．全部B．大部分C．一半D．很少2．质粒是基因工程最常用的运载体，它的主要特点是：①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”A．①③⑤