荧光分析法在药物分析中的应用.ppt

荧光标识法在药物分析中的应用

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小动物活体成像技术在药物研发领域的应用;概述：;20世纪70年代以来，尤其是近年来相继出现的多种敏捷度高的荧光分析法已经有效地用于药物制剂以及生物体液中药物的分析。如同步扫描荧光技术可用于违禁品中苯丙胺和吗啡加奎宁的测定；荧光偏振免疫分析法可用于血清中的庆大霉素、地答新、茶叶碱、五巴比妥、苯巴比妥等多种药物的检测，还可进行烧伤患者体内萘替米星的药代动力学研究；特异性荧光偏振免疫法可用来监测肾移植后环孢素A的全血浓度；荧光猝灭法用来测定苦参碱和氧化苦参碱的含量；固体表面荧光测定法用于血清中茶叶碱，以及其他多种抗菌药、抗气喘病药、抗惊风病药等的临床荧光分析；电解荧光光度法测定片剂中卡马西平的含量等等。其中，荧光探针技术已经发展成为借助荧光显微镜在分子水平上进行实时检测的重要手段。这种技术敏捷度高，可视性强，并且对研究的生物大分子或细胞干扰少，因此得到广泛应用。;荧光分析法的特性：;一该物质必须具有与所照射光线相似频率的吸取构造；

二该物质吸取了与其自身特性频率相似的能量之后，必须具有一定的荧光量子产率。;几种常用于药物分析的荧光分析法：;

对于有些药物的测定可以运用其对某一特定的有荧光性的体系的荧光淬灭作用对其进行定量分析和测定。庞志功等建立了测定苦参碱和氧化苦参碱的荧光分析措施。荧光淬灭法还用于对梭基苯丙酮酸、司帕沙星、甲硝哇等药物的含量进行分析。;

平常生活中，大部分药物没有荧光性。衍生化荧光分析就是借助化学反应将待测的某种药物接上某种特定的化学基团，去掉某种化学基团，或者变化某种特定基团，己到达变化待测药物的物质构造，从而变化待测药物的荧光特性之目的，提高待测物敏捷度的分析措施。;有些有机配体与金属离子形成的配合物能产生刚性平面构造，这种构造的物质能发射荧光。而我们平常用的药物诸多都具有有机配体，因此可以通过变化有机配体的构造而到达变化药物构造的目的。这些配体绝大多数为芳香族化合物：

例如-OH，-NH2，-SH，-COOH，-OR，-O，-NR3等，这些官能团能与金属离子形成稳定的五元或六元环配合物。;有时运用荧光分析法在药物测定过程中，需要使用品有刚性平面构造的芳香族化合物或者构造类似的杂环化合物作为荧光衍生剂。这些荧光衍生剂与有机物的活性基团(如羟基、氨基、羧基)发生反应，使反应体系的荧光性增强，或产生荧光产物。例如：运用NBD-F与青霉素反应产生荧光，而测定青霉素的含量。

此外，荧光衍生化反应还可以与色谱技术连用来测定某些药物的含量。例如：Gholamreza运用此措施检测阿其霉素、加巴喷定、托吡酯。;

胶束增敏荧光分析法是在胶束溶液中对药物的含量进行测定的荧光分析措施。表面活性剂的作用之一是在溶液中产生胶束环境，胶束环境对物质分子有如下作用:

(l)胶束环境对分子极性较小的弱荧光物质具有一定程度的增溶作用，因此对于此类物质，可用表面活性剂作为增溶剂;

(2)胶束环境对有一定荧光性质的物质分子的荧光发射具有增敏增稳作用，因此，对于此类物质，可用表面活性剂对其作用，使其起到增敏增稳的效果。

综合以上分析，对于某些几乎没有荧光性或荧光性很弱的药物用直接荧光措施无法进行分析测定期，可以通过使用表面活性剂产生胶束环境，从而使该药物的荧光强度得到一定程度的增强。;;

荧光动力学分析法重要包括催化荧光动力学和非催化荧光动力学两种类型。催化荧光动力学法是以催化反应为基础来测定某种物质浓度或者含量的措施。非荧光动力学催化法是通过测量非催化反应的速率而测定某种反应物(分析物质)的浓度或者含量，常用于某些有机物质的分析测定。;

物质分子吸取辐射光后，分子中的电子从最高占有轨道转移到该物质的另一种最低空轨道中，这种转移的过程叫电荷的转移。能形成电荷转移的物质分子必须有两部分，一种为电子予以体，另一种为电子接受体。

近年来，荷移荧光光谱法在药物分析中得到了非常广泛的应用。文献报道用荷移荧光光谱分析法测定的有洛美沙星、加替沙星、环丙沙星、诺氟沙星、吡哌酸等药物。;

同步扫描技术与常用的荧光测定措施最大的区别是同步扫描激发和发射两个单色器波长。由测得的荧光强度信号与对应的激发波长(或发射波长)构成光谱图，这种用同步扫描技术得到的光谱称为同步荧光光谱。

同步荧光分析法按光谱扫描方式的不一样可分为恒(固定)波长法、恒能量法、可变角法和恒基体法。和常规荧光分析法相比，同步荧光分析法具有谱图简化、选择性提高、光散射干扰减少等特点，它不仅可以对单一的药物进行分析，如