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蛋白质工程

蛋白质工程是一门利用基因工程技术改造蛋白质分子，赋予其新功能或提

高原有功能的技术。它涉及对蛋白质结构、功能和稳定性的研究，并利用基因操作手段对蛋白质进行改造。

PROTEINSTRUCTURE

POLYPEPTIDE

CHAINS

SECONDARY

STRUCTURE

TERTIARY

STRUCTURE

a-HELIX

区

生物医药

抗体药物、疫苗、酶

蛋白质工程

基因工程、分子生物学、生物化学

工业应用

生物材料、生物催化

课程介绍

DALTONLABS

ADVANCEDMOLECULARMODELINGKIT

178PCSMOLECULEMODELINGSET-STUDENTSEDITION

FORORGANICANDINORGANICCHEMISTRY

MODEL1-004

e

xoovie

蛋白质的基本结构

蛋白质是由氨基酸组成的生物大分子。氨基酸通过肽键连接形成多肽链，

多肽链进一步折叠形成具有特定三维结构的蛋白质。蛋白质的结构层次包括：

·一级结构：氨基酸的排列顺序

·二级结构：多肽链局部空间结构，如α螺旋和β折叠

·三级结构：整个多肽链的完整三维空间结构

·四级结构：多个多肽链通过相互作用形成的复杂结构

⑥

H

N—C—C

|

ROH

Variantgroup/Sidechain

Carboxylgroup

Hydrogenatom

Alphacarbon

H

H

Aminoacid

Aminogroup

ID2502415

om

运输作用

蛋白质作为载体，运输氧气、

营养物质，例如血红蛋白、

转运蛋白等。

催化作用

酶作为生物催化剂加速生化

反应，例如消化酶、代谢酶等。

结构作用

蛋白质构成细胞骨架，维持

细胞形状，例如胶原蛋白、角蛋白等。

免疫作用

抗体识别和结合抗原，保护

机体免受病原体侵害，例如免疫球蛋白。

蛋白质的功能

H₃CCH₃

Valine

天

Leucine

口

Phenylalanine

13

热不稳定性

蛋白质对温度敏感，高温会破坏蛋白质

结构，导致失活。

结构多样性

蛋白质具有复杂的三维结构，它们决定

了蛋白质的功能。

氨基酸组成

蛋白质是由氨基酸组成的长链，氨基酸

通过肽键连接在一起。

蛋白质的化学性质

口

Phenylalanine

按来源分类

动物蛋白、植物蛋白、微生物蛋白。

按结构分类

纤维蛋白、球状蛋白、膜蛋白。

按功能分类

酶、激素、抗体、结构蛋白。

蛋白质的分类

3

蛋白质的提取和纯化是蛋白质工程的重要步骤，它为后续研究和应用提供基础。通过细胞破碎，释放蛋白质，然后通过一系列分

离纯化技术，去除杂质，获得纯净的蛋白质。最后，通过纯度鉴定，确保蛋白质的质量符合要求。

2

1

蛋白质的提取和纯化

细胞破碎

破坏细胞壁和膜，释放蛋白质

纯度鉴定

确认蛋白质的纯度和完整性

分离纯化

去除杂质，获得纯净蛋白质

蛋白质的鉴定和分析

电泳

1根据蛋白质的分子量分离蛋白质。

质谱

2测定蛋白质的分子量和氨基酸序列。

免疫印迹

3使用抗体检测特定蛋白质的存在和丰度。

X射线晶体学

4确定蛋白质的三维结构。

目标蛋白的设计

确定目标蛋白的氨基酸序列和结构，并设计所需的突变或修饰。

基因克隆

将目标蛋白基因克隆到合适的载体中，并将其导入宿主细胞。

蛋白质表达

在宿主细胞中表达目标蛋白，并通过适当的方法进行纯化。

蛋白质表征

对表达的蛋白质进行结构和功能分析，以验证其是否符合设计要求。

蛋白质优化

根据表征结果，对目标蛋白进行进一步优化，提高其稳定性、活性或其他特性。

蛋白质工程的基本过程

目标基因的获取

从生物体中分离并获取目标

基因序列，这可以包括从基因组DNA中提取或使用合成基因技术。

转化宿主细胞

将重组DNA分子导入宿主细

胞，例如细菌、酵母或哺乳动物细胞。

载体的构建

选择合适的载体，将目标基

因插入到载体的特定位点，形成重组DNA分子。

克隆筛选

筛选含有目标基因的宿主细

胞，并进行扩增和保存。

基因克隆技术

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