化学发光法原理及应用.pptxVIP

;1;化学发光;1、化学发光对应的能级跃迁;化学发光反应发生的条件;化学发光反应及装置流程;1;1977年，Halman等将化学发光与抗原抗体免疫反应相结合，创建了化学发光免疫分析方法（chemiluminescentimmunoassay，CLIA），相较于传统免疫技术（放射免疫技术、酶免疫技术、荧光免疫技术等），CLIA具有自动化程度高、特异性好、精确度高、检测范围广等优势。;CLIA可分为三大类：;1、直接化学发光免疫分析

;用吖啶酯直接标记抗体，与待测标本中相应的抗原发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原-吖啶酯标记抗体复合物，这时只需加入氧化剂（H202）和NaOH行成碱性环境，吖啶酯即可在不需要催化剂的情况下分解、发光。由集光器和光电倍增管接收、记录单位时间内所产生的光子能，这部分光的积分与待测抗原的量成正比，可从标准曲线上计算出待测抗原的含量。;2、酶促化学发光免疫分析;鲁米诺+HRP发光体系;ALP+AMPPD发光体系;3、电化学发光免疫分析;商品化的流通型磁珠电化学发光免疫分析方法存在工作电极再生难，化学清洗难于完全恢复等问题，使工作电极表面性质因多次测定后性质差异大而导致分析结果误差大。Yang等人建立了一种基于双电极性质的磁珠电化学发光免疫检测新方法。钌联吡啶-TPA电化学发光体系在碳电极和金电极上具有不同的电化学发光行为，基此，Yang等人以化学沉积法制得了金纳米阵列电极（NEEs）聚碳酸酯膜为工作电极，在磁场作用下将Anti-CA-199（biotin）固定于磁珠富集于工作电极表面，结合检测目标物癌标志物CA-199后，再结合钌联吡啶衍生物标记的Anti-CA-199抗体，进行电化学发光检测，建立了快速检测胃癌标志物的电化学发光分析新方法。实验结果表明：电化学发光信号值与CA-199的浓度在0.5U/mL-20U/mL范围内呈良好的线性关系。;和酶联免疫分析进行对比;1;化学发光-分子印迹技术;1;优缺点对比;