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专题七生物技术实践;考纲要求:1.微生物分离和培养2.某种微生物数量测定3.培养基对微生物选择作用4.利用微生物发酵来生产特定产物以及微生物在其它方面应用5.从生物材料中提取一些特定成份6.利用发酵加工食品基本方法7.DNA粗提取与判定;构建网络·串联导思思维串联纵横联络;;(2)为了筛选可分解尿素细菌,在配制培养基时,应选择(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源,不选择其它两组原因是?
。?
(3)用来筛选分解尿素细菌培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有?
(答出两点即可)。?;1.微生物试验基本方法
(1)菌种保藏
①短期保留方法为暂时保藏:将菌种接种到固体斜面培养基上,放于℃冰箱中保藏。
②长久保留方法为甘油管藏:将菌液转移到甘油瓶中,放于℃冷冻箱中保留。
(2)检测培养基是否被污染方法:将未接种培养基放在适宜温度下培养,若培养基上,则说明培养基被污染,若培养基上,则说明培养基未被污染。
(3)倒平板操作:待培养基冷却至℃左右时,在附近倒平板。;(4)平板划线法:经过接种环在琼脂固体培养基表面操作,将聚集
菌种分散到培养基表面。如图:;(5)稀释涂布平板法:将菌液进行一系列,然后将不一样稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面,进行培养。在稀释度足够高菌液里,聚集在一起微生物将被分散成,从而能在培养基表面形成
。
2.微生物筛选
(1)筛选标准:利用选择培养基,提供条件,同时
其它微生物生长。;(2)两种菌株筛选、判别比较;(2)间接计数法(活菌计数法)
①原理:当样品稀释度足够高时,培养基表面生长一个菌落,起源于样品稀释液中一个活菌,经过统计平板上菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②操作:设置,增强试验说服力与准确性。同时,为了确保结果准确,普通选择菌落数在平板进行计数。
③计算公式:每克样品中菌株数=,其中,C代表某一稀释度下平板上生长平均菌落数,V代表涂布平板时所用稀??液体积(mL),M代表稀释倍数。
④缺点:计数结果易偏低。;考向攻坚;;;2.(·四川泸州一诊)伴随当代生物技术不停进步,微生物已经是人类生活和生产中非常主要资源,能够肥沃土壤、清洁环境、改进我们食物、生产药品等。
(1)每种微生物利用,都离不开微生物分离、提纯和培养。试验室筛选微生物需人为提供有利于目标菌生长等条件,同时抑制或阻断其它微生物生长,能到达此目标培养基称为,在试验中,为使培养基能到达此目标,需设置对照组,与试验组不一样是。?;(2)惯用分解纤维素细菌来处理生活垃圾,可用法来筛选该目标菌,采取?
法将菌种接种到固体培养基上。
(3)菌种需暂时保藏时,要先将菌种接种到试管斜面固体培养基上,在
温度下培养,当菌落长成后放入冰箱保留。?;(4)在发酵生产中,惯用到各种微生物协同作用,但不一样微生物发酵条件不一样。在用苹果制作苹果醋过程中,先后用到酵母菌和醋酸菌,二者发酵条件前者是,后者是。?;3.(·河北唐山一模)蛋白酶在生物医药和日用化工等生产领域含有主要经济价值。某同学为筛选产蛋白酶高产菌株,做了以下试验步骤(配制了以下培养基,在适宜条件下培养):;(1)为实现筛选目标,步骤Ⅰ所使用培养基配方中,应去除并加入高浓度。?
(2)为实现目标菌分离和计数,步骤Ⅱ所使用培养基中还应加入制成平板,采取接种方法是?,试验结果如图A。?;(3)步骤Ⅲ应挑取图A中处菌落,本步骤目标是。
(4)图B是该蛋白酶和其它酶热稳定性数据,即酶在不一样温度下保温足够长时间,再在酶活性最高温度下测其酶活性。在该蛋白酶工业化生产过程中,通常需对发酵液在60~70℃保温一定时间处理,其作用是
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