基因工程及其应用.pptxVIP

第二节基因工程及其应用

能发光的水母

不能发光的热带斑马鱼

请您欣赏

能否让热带鱼也能发光?

设想

能发荧光的热带斑马鱼

普通热带斑马鱼是不发荧光的

请您欣赏

抗虫害的玉米

抗虫棉

能产生人胰岛素的大肠杆菌

每100kg猪或牛的胰腺中提取4~5g胰岛素

1979年，利用大肠杆菌的DNA分子重组，2000L大肠杆菌的培养液中提取100g胰岛素，相当于2吨猪胰腺中提取的量

从大肠杆菌说起－－胰岛素

问题探讨

基因工程

大肠杆菌可以产生人类的胰岛素

为什么要把人的基因“嫁接”到细菌上？

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把人胰岛素基因“嫁接”到大肠杆菌中去后与普通细菌有什么不同？

胰岛素提取困难，试着用其他科学方法去生产

怎样把人胰岛素基因“嫁接”到大肠杆菌中去？

一、基因工程原理

——基因拼接技术或DNA重组技术。

1、概念：通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的个别基因复制出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。

2、原理：

3、操作水平：

4、结果：

基因重组

DNA分子水平

定向地改造生物的遗传性状，获得人类所需要的品种和生物产品。

5、操作环境：

生物体外

基因工程理论基础：①生物界共用一套遗传密码

所用生物的DNA分子结构及碱基互补配对原则相同

基因工程的优点：可以实现不同物种之间的基因转移，打破了有性生殖的远缘杂交不亲和的生殖障碍，能培育出前所未有的新品种。

基因工程的意义：使人类有可能按照自己的意愿定向地改变生物的遗传性状，培育新品种。

基因的剪刀——限制性核酸内切酶（简称限制酶）

特点：专一性。本质：蛋白质。分布：主要在微生物中

即：一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子。

例：大肠杆菌(EcoRI)的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。

1、基因操作的工具

磷酸二酯键

限制酶

被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端？

是的。因为酶具有专一性。

基因的针线——DNA连接酶（本质：蛋白质）

磷酸二酯键

作用：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。

使用DNA连接酶制作重组DNA分子

甲片段

CTTCATGAATTCCCTAA

GAAGTACTTAAGGGATT

乙片段

GGCATCTTAA

AATTCCGTAG

重组DNA分子

GGCATCTTAA

AATTCCGTAG

基因的运载工具——运载体（本质：DNA)

质粒存在？本质？

常用运载体：质粒、噬菌体或动植物病毒

最常用的运载体是：质粒

质粒是存在于许多细菌以及酵母菌等生物的细胞质中，是拟核或细胞核外能够自主复制的小型环状双链DNA分子。

B

A

C

能够在宿主细胞中复制并稳定保存

具有标记基因，便于进行筛选

具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接

运载体的特点：

2、基因操作的基本步骤

目的基因是人们所需要转移或改造的基因。

如:苏云金芽孢杆菌的抗虫基因，还有植物的抗病（抗病毒、抗细菌）基因、种子贮藏蛋白的基因，以及人的胰岛素基因、干扰素基因等。

提取方法

直接分离：鸟枪法

人工合成

1）提取目的基因

供体细胞、受体细胞

目的基因与运载体的结合过程，实际上是不同来源的基因重组的过程。

注意：要用同一种限制酶切取目的基因和运载体，并用DNA连接酶连接，形成重组DNA分子。

目的基因与运载体结合

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使用DNA连接酶制作重组DNA分子

甲片段

CTTCATGAATTCCCTAA

GAAGTACTTAAGGGATT

乙片段

GGCATCTTAA

AATTCCGTAG

重组DNA分子

GGCATCTTAA

AATTCCGTAG

3）将目的基因导入受体细胞

对动物用方法：显微注射法

用口径为1μm的DNA注射器，将大量的目的基因片段注入到受体细胞内。

对植物往往借鉴细菌或病毒侵染细胞的方法

4）目的基因的检测和鉴定

受体细胞必须表现我们所需要的性状，才能说明目的基因完成了表达。即是否产生了目的基因表达的产物（蛋白质）进行检测

生物界的统一性

细菌和人是差异非常大的两种生物,通过基因重组后,细菌能够合成人体的胰岛素，这说明了什么？

——所有生物共用一套遗传密码

思考与讨论

二、基因工程的应用

运用基因工程技术育种的方法：①不但可以培养优质、高产、稳产、各种抗逆性好的农作物及畜、禽新品种，②还可以培养出具有特殊用途的动、植物。

生长快、耐不良环境、肉质好的转基因鱼(中