动物细胞培养课件-高二下学期生物人教版选择性必修3.pptxVIP

第2章细胞工程

第2节(第一课时)

动物细胞培养;

自主预习

阅读P43-44,快速找答案

·1)动物细胞工程的3大技术

·2)动物细胞培养的4大条件

·3)找几个名词：细胞贴壁、接触抑制、原代培养、传代培养;

动物细胞工程的基础;

从社会中来皮肤的自体移植

小面积烧伤：患者通过切除+植皮(自身)后恢复。大面积烧伤?;

PART01

动物细胞培养的条件;

1.概念取动物组织，将它分散成单个细胞，在适宜条件生长和增殖的技术。

2.原理细胞增殖(有丝分裂)

3.目的获得细胞或者细胞产物;

一、动物细胞培养的条件

动物细胞培养

5.培养条件;

一、动物细胞培养的条件

动物细胞培养

营养直接用合成然培养基吗?Why?

合成培养基+血清等天然成分;

①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理

②在无菌环境下进行操作

③添加一定量的抗生素→防止微生物污染;

95%空气(细胞代谢必需)和5%CO?(维持pH)

培养皿或松盖培养瓶置于CO?培养箱。;

PART02

动物细胞培养的过程;

二、动物细胞培养的过程

阅读P44-45,思考并回答下列问题：

1.动物细胞培养过程为什么将组织分散成单个细胞呢?可用什么方法?

2.体外培养动物细胞有哪些类型?

3.什么是细胞贴壁?什么是接触抑制?

4.什么是原代培养和传代培养?

5.为什么要进行分瓶培养?怎么处理?

6.动物细胞培养与植物组织培养有什么异同?;;

二、动物细胞培养的过程

2.分散成单个细胞

方法：机械的方法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间

①说明动物细胞间的物质主要是什么成分?蛋白质

②用胃蛋白酶可以吗?不可以，因为胃蛋白酶的最适PH为1.5左右③胰蛋白酶处理时间过长，会怎样?

细胞膜也含蛋白质，长时间会分解细胞膜蛋白，破坏细胞结

构，把细胞消化掉。注意控制时间和酶用量。

3.制备细胞悬液用培养液将细胞制成细胞悬液。;

二、动物细胞培养的过程;

思考：细胞培养一段时间，分裂会受阻，这是为什么?怎样解决这一问题?

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贴壁生长与接触抑制;

正常细胞增殖到相互接触的时候，糖蛋白识别了这种信息，会使细胞

停止继续增殖，出现接触抑制的现象。某些异常细胞能解除这种现象。;

5.传代培养取动物组织

制成细胞悬液转入培养液进行原代培养;

将收集的细胞制成细胞悬液，分瓶培养

动物细胞的整个培养过程中可能多次用到胰蛋白酶或胶原蛋白酶：

第一次：使组织细胞分散开

使细胞从瓶壁上脱离下来，分散成单个细胞，

贴壁细胞传代培养时：

便于分瓶后继续培养。;

继续培养

(50代以后)少数细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死

大部分细胞性，这些细胞已经发生了突变，正朝癌细胞发展衰老死亡

有限细胞系无限细胞系;

①原代培养：指动物组织经处理后的初次培养。

②细胞贴壁：某些细胞需要贴附于某些基质表面才能增殖，如贴附在培养瓶的瓶壁上。

③接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象。

④传代培养：分瓶后的细胞培养。

细胞密度过大、

有害代谢物积累、

营养物质缺乏等细胞分裂受阻

接触抑制解决;

比较项目;

PART03

干细胞培养及其应用;

动物和人体内仍保留的少数具有分裂和分化能力的细胞。在一定条件下，干细胞可以分化成其他类型的细胞。

干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血_等多种组织和器官中。;

3.应用实例在体外分化成心肌细胞、神经元细胞和造血干细胞等

4.局限性必须从胚胎中获取，涉及伦理问题；因而限制了在医学上的应用。;

治疗白血病及一些恶性肿瘤放疗或化疗后引起的造血系统、免疫系统功能障碍等疾病

治疗神经组织损伤和神经系统退行性

疾病(如帕金森病、阿尔茨海默病等);

1.概念通过体外诱导小鼠成纤维细胞得到的类似胚胎干细胞的一种细胞

①将特定基因或蛋白导入细胞(成纤维细胞、已分化的T细胞、B细胞)。

2.制备方法

②用小分子化合物诱导形成。

①诱导过程无须破坏胚胎；

[②iPS细胞可取自病人的体细胞，理论上可以避免免疫排斥反应。;

三、干细胞的培养及其应用

iPS细胞应用

取成纤维细胞

Oe转入相关因子

转入相关因子