TaWRKY33调控小麦茎基腐病抗性功能研究.pdfVIP

摘要

小麦茎基腐病（Fusariumcrownrot，FCR）在小麦生产上普遍发生，俨然成为一种

国际性病害，对农业生产造成巨大危害。目前，小麦FCR抗性资源有限，尚未发现对

小麦FCR免疫或高抗的小麦品种。挖掘小麦抗FCR基因并解析其抗病机理是解决上述

问题的重要基础。研究显示，WRKY转录因子在拟南芥、水稻等作物抗病途径中发挥

着重要的调控作用，但其家族成员是否参与小麦抗FCR过程尚不清楚。本研究克隆了

小麦TaWRKY33基因，分析了其分子特性，并初步探究其在小麦抗FCR过程中的功能

与机制，主要研究结果如下：

1.从小麦百农AK58（矮抗58）中成功克隆TaWRKY33基因。生物信息学分析显示，

TaWRKY33基因编码区全长1689bp，编码562个氨基酸，等电点为6.11，分子量为

59.85kDa；具有2个典型的WRKYGQK结构域，“C”端具有C2H2锌指结构，属于

WRKYⅠ类家族；系统进化关系表明，TaWRKY33与大麦、节节麦和水稻等禾本科植物

的亲缘关系最为相近。TaWRKY33启动子包含ABRE、CGTCA-motif和TGACG-motif

等与ABA和MeJA等激素相关的顺式作用元件，以及与植物抗胁迫相关的MYB、MYC

结合位点，表明该基因可能与小麦抵御生物/非生物胁迫有关。

2.小麦公共转录组数据和荧光定量表达分析的结果表明，TaWRKY33在小麦苗期

（根、茎、叶）和成株期（雌蕊、雄蕊、穗轴、颖壳、旗叶、茎杆、茎节、倒二叶、

倒三叶、倒四叶）不同组织均有表达，且随着生长发育进程，其表达呈现升高趋势。

qRT-PCR结果表明，TaWRKY33的表达响应ABA与MeJA等激素，与启动子顺式作用

元件分析结果一致。另外，TaWRKY33在白粉病菌、条锈病菌、叶枯病菌和假禾谷镰刀

菌等生物胁迫后被显著诱导表达。TaWRKY33在感FCR种质X73中出现更早的诱导表

达（3h）；在抗FCR种质X413中，其表达峰值出现在侵染后12h。TaWRKY33在抗、

感FCR种质中的显著表达差异暗示了其可能在小麦抗FCR过程中发挥作用。

3.病毒诱导基因沉默（BSMV-VIGS）实验结果表明，TaWRKY33沉默株系接种

FCR病原菌后，茎基腐病病情比对照更严重；TaWRKY33沉默植株中病程相关蛋白基因

TaPR1、TaPR4A、TaPR4B与活性氧清除相关基因TaPOD、TaCAT显著下调表达，SOD、

CAT酶活性和MDA的含量降低，表明TaWRKY33基因具有正向调控茎基腐病抗性的作

用。

4.TaWRKY33蛋白定位于细胞核，且具有转录激活活性。酵母双杂交实验表明

TaBSD2、TaRcaB、TabHLH6、TaLRR3与TaWRKY33存在相互作用。表达模式分析显

示，4个互作基因在假禾谷镰刀菌胁迫下出现不同程度的诱导表达，表明它们可能与

TaWRKY33协同调控小麦抗FCR过程。

综上，TaWRKY33属于WRKYⅠ类家族的基因，受不同病原菌、激素等的诱导，具

有正向调控小麦FCR抗性的作用，且可能与TaBSD2、TaRcaB、TabHLH6、TaLRR3协

同发挥作用。然而，其具体作用机理需要进一步研究。本研究结果为解析小麦抗FCR

机理提供了一定的理论基础，也为小麦抗病育种提供了基因资源。

关键词：小麦，茎基腐病，TaWRKY33，抗病基因

ABSTRACT

Fusariumcrownrot(FCR)isawidespreaddiseaseinwheatproduction,andhasbecomean

internationaldiseasethatcausesgreatharmtoagriculturalproduction.Currently,FCR-resistantresourcesare

verylimited,andwheatvarietiesthatareimmuneorhighlyresistanttothisdise