生物化学检验常用技术.pptVIP

第二节电化学分析技术三、电容量分析法根据滴定过程中电极电位的变化来确定滴定终点的分析方法。滴定过程中，随着滴定剂的加入，发生化学反应，待测离子或与之有关的离子活度（浓度）发生变化，指示电极的电极电位（或电池电动势）也随着发生变化，在化学计量点附近，电位（或电动势）发生突跃，由此确定滴定的终点电容量分析法第30页，共63页，星期日，2025年，2月5日第三节干化学分析技术第31页，共63页，星期日，2025年，2月5日第三节干化学分析技术指将液态样品如血浆、血清、尿液等置于含有试剂的固相载体上发生反应，依照反应结果定量测定样品中特定成分的浓度或活度的一项技术干化学分析是一种专门使用固相载体试剂进行临床化学检验的分析仪，它通过反射光度法、差示电位法等方法定量测出样品中特定成分的浓度或活度干化学分析仪第32页，共63页，星期日，2025年，2月5日干式化学的多层膜试剂载体基于反射光度法的多层膜基于差示电位法的离子选择电极的多层膜基于荧光技术和竞争免疫技术的荧光反射光度法多层膜干化学技术普遍采用多层膜固相试剂技术，即干式化学的多层膜试剂载体，它集中现代化学、光学、酶工程学、化学计量学和计算机技术于一体，已使其作为定量方法一、干化学分析技术的基本原理第三节干化学分析技术*第33页，共63页，星期日，2025年，2月5日理论基础：遵从Kubelka-Munk理论光反射率与固相层的厚度、单位厚度的光吸收系数以及固相反应层的散射系数有关系，当固相层厚度和固相反应层的散射系数固定时，光吸收系数同待测物的浓度成正比（一）反射光度法第三节干化学分析技术*第34页，共63页，星期日，2025年，2月5日多层膜干片结构（1）样本扩散层（2）反射层（3）辅助试剂层（4）试剂层（5）透明支持层基于反射光度法的多层膜干片结构示意图第三节干化学分析技术*第35页，共63页，星期日，2025年，2月5日基于传统湿化学分析的离子选择电极原理，用于测定无机离子（二）差示电位法多层膜结构（1）离子选择性敏感膜（2）参比层（3）氯化银层（4）银层（5）支持层第三节干化学分析技术第36页，共63页，星期日，2025年，2月5日干化学自动分析仪已广泛应用于检验医学的各个方面，检测的项目已多达70余项，包括常规生化、内分泌激素、毒素、药物浓度分析以及特种蛋白等免疫学检验干化学分析仪的分类反射光度法系统胶片涂层技术分析系统袋式分析仪二、干化学分析技术在临床检验中的应用第三节干化学分析技术*第37页，共63页，星期日，2025年，2月5日干化学分析法的特点：速度快，灵敏度和准确度与典型的分离式仪器相近应用Lambert－Beer定律时必须符合3个条件：超微量，操作简单，占用空间小，使用过程中灵活机动性强脱离了传统的分析方法，所有的测定参数均存储于仪器的信息磁场块中第三节干化学分析技术*第38页，共63页，星期日，2025年，2月5日区别点干化学湿化学试剂固相，大多无需定标，稳定周期长（数月），全血可直接上机检测液体，需要定标，稳定周期短，全血不可直接上机检测仪器磁卡校正，无需排水系统，分析前后无需清洗每次测试原则上需要校正，需要排水系统，测试前后需清洁反应载体固相介质反应杯检测方法反射光度法透射光度法电解质测定差示电位法离子选择性电极法理论基础Kubelka-Munk理论和Williams-Clapper公式Lambert-Beer定律干化学和湿化学生化检测的主要区别第三节干化学分析技术*第39页，共63页，星期日，2025年，2月5日1.仪器监测2.校准频度3.质控物4.干片试剂的储存与使用5.工作环境温度和湿度三、干化学分析技术的影响因素第三节干化学分析技术*第40页，共63页，星期日，2025年，2月5日第四节电泳分析技术第41页，共63页，星期日，2025年，2月5日第四节电泳分析技术1937年瑞典的Tiselius创造了Tiselius电泳仪，最早建立了研究蛋白质的移动界面电泳方法1948年Wieland和Fischer重新发展了以滤纸作为支持介质的电泳方法1950年Durrum用纸电泳进行了利用各种固体物质（如各种滤纸、醋酸纤维素薄膜、琼脂凝胶、淀粉凝胶等）作为支持介质的区带电泳方法1959年Raymond和Weintraub利用人工合成的凝胶作为支持介质，创建了聚丙烯酰胺凝胶电泳由80年代发展起来的新的毛细管电泳技术由90年代至今，电流分析仪的最大变化特点为自动化程度日益提高，应用领域大大增加第