第二章天然产物的提取分离与结构鉴定.pptVIP

第126页，共187页，星期日，2025年，2月5日第127页，共187页，星期日，2025年，2月5日氨基酸的离子交换分离原理第128页，共187页，星期日，2025年，2月5日离子交换柱色谱——操作技术树脂的预处理装柱上样洗脱再生第129页，共187页，星期日，2025年，2月5日定义以凝胶作为固定相，选择适当的溶剂进行洗脱，使混合物分子中分子量大小不同的化合物得到分离的方法分离原理葡聚糖凝胶是由葡聚糖和甘油基通过醚桥相交链而成的多孔性网状结构。凝胶吸水后形成凝胶粒子，凝胶粒子构成网眼，小分子进入，大分子流下。如同按照分子大小过筛一样，故称为“筛层析”。凝胶层析第130页，共187页，星期日，2025年，2月5日凝胶是一种不带电的具有三维空间的多孔网状结构的物质，每个颗粒的细微结构及筛孔的直径均匀一致，小分子可以进入凝胶网孔，而大分子则排阻于颗粒之外。第131页，共187页，星期日，2025年，2月5日凝胶层析又称分子筛过滤、排阻层析等，依据是多孔的载体对不同体积和不同形状分子的排阻能力的不同，从而对混合物进行分离。第132页，共187页，星期日，2025年，2月5日薄层色谱法——定义分类吸附薄层色谱分配薄层色谱在平面载板上均匀涂布适宜的固定相形成一薄层，将欲分离的试样于薄层板上点样，随着移动相溶剂的移动展开，混合物中各成分获得分离的方法。第94页，共187页，星期日，2025年，2月5日常用的吸附剂——硅胶应用最为广泛!粒径：200-300目种类：硅胶G——硅胶+粘合剂煅石膏硅胶GF254——含有荧光物质硅胶H——不含粘合剂煅石膏硅胶HF254——含有荧光物质第95页，共187页，星期日，2025年，2月5日常用的吸附剂——其它氧化铝：碱性、中性、酸性三种规格。聚酰胺：“氢键吸附”，对羟基类成分有很好的分离效果。附子中乌头碱的限量检查，就是采用碱性氧化铝制备的薄层板第96页，共187页，星期日，2025年，2月5日薄层色谱法——展开剂的选择待测组分的Rf值宜控制在0.2-0.8之间各组分斑点圆且集中混合溶剂临用前新鲜配制要根据被分离物质的溶解性、酸碱性、极性等性质，结合吸附剂的吸附性能，综合考虑，可选择单一溶剂或混合溶剂系统。若分离某些酸性或碱性成分，可在所选溶剂中加入少量的酸或碱或将一小杯挥发性酸或碱放置色谱缸内。第97页，共187页，星期日，2025年，2月5日操作技术——手工铺板取一份吸附剂和三份水（或另加黏合剂），在研钵中向一个方向研磨混合成均匀糊状（无气泡和结块），均匀涂布在薄层板上。玻璃板层析专用玻璃板，清洗干净用量10×20CM，3g硅胶黏合剂0.2～0.5%CMC-NA溶液，0.3%干燥水平台面，室温下自然完全晾干检查表面光滑平整，均匀，无杂质操作要点第98页，共187页，星期日，2025年，2月5日CMC-Na溶液的配制浓度0.2～0.5%，一般用的浓度是0.3%。浓度过稀，使用的时候薄层易掉粉浓度过大，用硫酸显色加热易变黑使用上清液取蒸馏水1000ml，在加热并不断搅拌的条件下，缓慢加入羧甲基纤维素钠0.3g，至完全溶解。静置冷却，临用前取上清液备用。第99页，共187页，星期日，2025年，2月5日裂开的薄层板不能使用!操作技术—活化涂布后的薄层先在室温下阴干，至完全干透后，在使用前置适当温度烘烤一定时间进行活化，然后置干燥器中备用。不同薄层活化条件略有不同。硅胶105℃-110℃30～60min氧化铝105℃-110℃30min第100页，共187页，星期日，2025年，2月5日操作技术——点样定量微升毛细管薄层点样毛细管溶液沸点适中，对成分溶解度好（甲醇、乙醇、氯仿、醋酸乙酯等）。斑点不宜过大,以小于3mm为宜，采用多次点加法。点样量应适中。毛细点样管或定量毛细点样管尽可能往薄层板中间点。第101页，共187页，星期日，2025年，2月5日操作技术——展开预先用展开剂将密闭的色谱缸饱和片刻，然后将点样后的薄层板置缸内支架上，勿与展开剂接触，预饱和一定时间，使缸内饱和的展开剂气体达到平衡。饱和后，将薄层板点有试样一端浸入展开剂约0.5cm深处（