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糖尿病实验室检查及其意义

主要内容HbA1c测定及其意义胰岛B细胞自身免疫抗体的检测尿系列蛋白测定

一、HbA1c的结构和形成机制

01GHb是葡萄糖分子和血红蛋白A某些特殊部位分子经缓慢而不可逆非酶促反应而形成的产物。02在红细胞中，葡萄糖的摄取无需胰岛素介导，其细胞内葡萄糖浓度随血糖的升高而升高，很快与血浆葡萄糖水平达到平衡。03葡萄糖最初与HbA的β链-N端的缬氨酸残基发生氨基反应，迅速以共价健形成醛亚胺化物，其性质不稳定，可逆，但逆反应速度较正反应慢。04醛亚胺经脱水，分子重新排列，通过酮氨基和葡萄糖连接，成为氨基酮化合物，其性质稳定，此反应不可逆，。05红细胞内糖化血红蛋白水平随红细胞暴露于高血糖的时间和高血糖的程度有关。HbA1c的形成原理

血红蛋白的糖基化Glucoseentersredbloodcellswhereitreactswiththehemoglobin

成人糖化和非糖化的血红蛋白HbHbA0HbA1HbA1aHbA1bHbA1cHbA(????)HbA2(????)HbF(????)97%0.5%2.5%AdultHbFetalHbNon-

glycatedGlycatedIsincreasedinpatients

with?-thalassemia,whileHbA1cis

reduced;inthiscaseGHbshouldbemeasured6%94%-mainglycohemoglobin-usedsince20years

forglycemiccontrolwithHPLC5%A1aandA1b:

concentration

verylow

A寿命：120days.B50%的HbA1c值与过去30天内的平均血糖水平相关C40%的HbA1c值与过去31－90天平均血糖水平相关.D只有10%HbA1c与过去91－120天平均血糖水平相关.HbA1c形成的动力学

平均血糖水平(mg/dl)糖化血红蛋白水平（%）糖化血红蛋白每变化1%所对应的平均血糖的变化为30mg/dl.

记住餐前和餐后血糖对HbA1c的相对影响若HbA1c10.2%(参考DCCT)??70%HbA1c源于空腹血糖30%HbA1c源于餐后血糖若HbA1c7.3%(参考DCCT)?70%HbA1c源于餐后血糖30%HbA1c源于空腹血糖若HbA1c7.3-8.4%(参考DCCT)?空腹和餐后血糖各占50%

2型糖尿病空腹和餐后血糖对A1C的影响

二、HbA1c的测定方法和影响因素

阳离子交换树脂微柱层析法01HPLC02电泳法03亲和色谱微柱法04放免法05免疫比浊法06免疫竞争抑制法07检测方法

微柱内的阳离子交换树脂是目前国内应用较为广泛的方法。在PH近7时树脂解离后带阴电荷，而Hb解离后带阳电荷，二者可形成离子键。由于GHb的阳电荷比HbA少，与树脂的结合力相对低，容易被洗脱。用分光光度计分别测定洗脱液中GHb和溶血物中总Hb的吸光率（A），可计算出GHb占总Hb的百分比（％）。

目前HPLC法测定HbA1c使其准确性和重复性得到很大的提高。美国临床化学协（AACC）糖化血红蛋白标准化分会和IFCCHbA1C标准化工作组建议，HPLC方法可作为检测糖化血红蛋白的金标准，希望以此使大多数的实验方法能够参照“指定的方法”实现标准化。糖化血红蛋白自动分析仪采用离子交换HPLC法测定HbA1c，利用能交换离子的材料为固定相来分离离子型化合物的方法。该法直接测定全血HbA1c，其批内和批间变异系数CV均可以小于1%（CV1%），结果比较精确，检测结果不受存在的变异型血红蛋白及其衍生物的影响，特别适合于糖尿病人的监控。HPLC方法

01血红蛋白分子病、地中海贫血、溶血性贫血、怀孕等红细胞寿命缩短，从而糖化血红蛋白的量降低；肾功能不全、慢性酒精中毒等减慢HB的代谢，使其寿命延长，从而使糖化血红蛋白的量增加。02影响因素

三、HbA1c与糖尿病慢性并发症

HbA1c升高伴并发症的风险增加StrattonIMetal.BMJ2000;321:405–412.心梗微血管病变每1000患者年的发生数

UKPDSGlucoseStudyResultsAmedianHbA1cdifferenceof0.9%(7.0v.s.7.9)over10years,reducedriskby:P12%Anydiabetesrelatedendpoint0