DB3210T 1119-2022 蕙兰种苗组培生产技术规程.docxVIP

ICS65.020.20CCSB05

3210

扬州市地方标准

DB3210/T1119—2022

蕙兰种苗组培生产技术规程

TechnicalregulationforthetissuecultureofCymbidiumfaberiseedlings

2022-06-10发布2022-06-10实施

扬州市市场监督管理局发布

I

DB3210/T1119—2022

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由江苏里下河地区农业科学研究所提出。

本文件由扬州市农业农村局归口。

本文件起草单位：江苏里下河地区农业科学研究所。

本文件主要起草人：孙叶、刘红、魏晓羽、刘春贵、马辉、张甜、袁媛、李风童、包建忠。

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DB3210/T1119—2022

蕙兰种苗组培生产技术规程

1范围

本文件规定了蕙兰种苗组培生产的培养基配制和灭菌、种苗组培、试管苗驯化、试管苗移栽、病虫害防治、出圃规格及生产记录要求。

本文件适用于蕙兰种苗组培生产。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T8321.10农药合理使用准则（十）NY/T2306花卉种苗组培快繁技术规程

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4培养基配制和灭菌

4.1培养基配制流程

按培养基配方称取一定量MS培养基干粉、蔗糖、蛋白胨、激素和琼脂粉，加入一定量的蒸馏水加热至琼脂完全溶解后，用1mol/L的氯化氢或1mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值至5.4～5.8，趁热把30ml~50ml培养基分装于组培瓶中。

4.2培养基配方

种子播种配方：1/2MS+0.5mg/L（萘乙酸）+20g/L（蔗糖）+0.5g/L（蛋白胨）+0.5g/L（活性碳），pH值5.1～5.4。

茎尖诱导配方：1/2MS+1.5mg/L（6-苄氨基腺嘌呤）+1.5mg/L（萘乙酸）+20g/L（蔗糖）+6g/L（琼脂），pH值5.1～5.4。

增殖配方：1/2MS+0.5mg/L（萘乙酸）+蔗糖20g/L（蔗糖）+0.5g/L（蛋白胨）+0.5g/L（活性碳）+6g/L（琼脂），pH值5.1～5.4。

诱芽配方为：1/2MS+（1～3）mg/L（6-苄氨基腺嘌呤）+（0.5～1）mg/L（萘乙酸）+20g/L（蔗糖）+0.5g/L（蛋白胨）+6g/L（琼脂），pH值5.1～5.4。

生根配方：1/2MS+（0.2～0.5）mg/L（萘乙酸）+20g/L（蔗糖）+0.5g/L（蛋白胨）+0.5g/L（活性碳）+6g/L（琼脂），pH值5.1～5.4。

4.3高压灭菌

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在高压蒸汽灭菌器内压力0.12MPa，121℃灭菌30min。接种工具（包括镊子、手术刀、垫盘等）可随培养基一起灭菌，灭菌后放置接种室，接种过程中采用酒精灯灼烧或高温灭菌器进行灭菌。

5种苗组培

5.1原球茎诱导培养5.1.1种子繁殖

5.1.1.1蒴果采收与保存

选择授粉后5个月～6个月、种皮微黄的蒴果采收备用，2个月内播种的蒴果保存于4℃低温冰箱，12个月内播种的蒴果保存于-20℃低温冰箱。

5.1.1.2蒴果灭菌

蒴果用75%酒精表面消毒后放置于无菌接种室超净工作台，放入0.1%的氯化汞溶液浸泡10min，取出晾干，浸入95%酒精3s，取出即刻在酒精灯上点燃，待蒴果表面酒精燃烧完，放置于无菌垫盘备用。

5.1.1.3种子无菌播种

在超净工作台上用解剖刀切开朔果，取出种子，放入高温灭菌后的液体播种培养基，摇晃组培瓶使种子浸泡并分散于营养液中，一个蒴果无菌播种8瓶～10瓶。

5.1.1.4种子萌发

无菌播种后暗培养，室温23℃,3个月～12个月后种子开始萌发形成原球茎