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第八章花药和花粉培养

花粉与花药得培养(pollenandantherculture)

就是指在人工合成培养基上,改变花粉得发育途径,使其不形成配子,而像体细胞一样进行分裂、分化,由单个花粉粒发育成完整单倍体植株得技术。

一、概念

异同点:

相同点:二者培养得目得一样,都就是要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞,最后发育成单倍体植株。

不同点:

①花药培养属器官培养,花药就是植物花得雄性器官,包括体细胞性质得药壁与药隔组织,以及雄性性细胞得花粉粒;花粉培养属细胞培养。

②花粉培养没有药壁组织干扰,可计数小孢子产胚率,可观察雄核发育得全过程。

③单倍体产量高。

④花粉培养技术更复杂,比花药培养难度大。

二、植物花药/花粉培养历史

Guha与Maheshwari(1964)曼陀罗花药培养

Nitsch与Norreel(1973)烟草花粉培养(游离小孢子培养)Chu(1973)小麦花粉培养

(早期花药培养主要依靠小孢子得自然胚胎发生产生单倍体,能自发形成胚胎发生得基因频率较低,效率极低)

80年代后期到90年代期间,花培技术迅速发展。许多作物小孢子培养已经成功。十字花科、麦类、水稻、玉米等。

90年代,一些先前被认为就是不易进行小孢子培养得基因型也相续成功Konzak(1999)。

通过花药培养育成得甜椒新品种

:

海花三号

三、花药与花粉培养得应用

1)诱导形成单倍体,快速获得纯系,缩短育种周期;

常规育种需4-6年获得纯系,而小孢子培养仅需一年。

1、作物育种

常规育种在杂交F5、F6代开始选择;花药培养在F1或F2代进行培养,再人工加倍处理、缩短育种周期3--5年

克服后代分离,大大缩短育种周期

花粉单倍体就是纯合配子体,从来源于配子体得植株中选择某一种基因型得概率就是(1/2)n,而从常规杂交F2代群体中,选择某一基因型得概率为(1/2)2n,故单倍体育种得选择效率为常规育种得2n倍。

2)提高目标基因型得选择效率

例子:

二倍体供体植株基因型为AaBb,若要从后代中选择基因为AAbb得纯合单株

常规方法:AAbb出现得概率为1/16,并且不能将AAbb与Aabb、aAbb区分开。

AB aB Ab ab

AB AABB AaBB AABb AaBb

aB aABB aaBB aABb aaBb

Ab AabB AabB AAbb Aabb

ab aAbB aabBaAbb aabb

例子:

二倍体供体植株基因型为AaBb,若要从后代中选择基因为AAbb得纯合单株

单倍体方法:AAbb出现得概率为1/4。

从来源于配子体得植株中选择某一种基因型得概率就是(1/2)n,而从常规杂交F2代群体中,选择某一基因型得概率为(1/2)2n,故单倍体育种得选择效率为常规育种得2n倍。

大家有疑问的，可以询问和交流

可以互相讨论下，但要小声点

3)诱变育种中得作用

植株不受显隐性得影响,在诱变育种中能在当代及时获得突变个体,染色体加倍后成为稳定得纯系。

可探索亲本染色体组得构成。分析单倍体植物减数分裂时,形成二价体得数目与形状,能确定染色体组内就是否存在同源染色体。

2、物种进化研究

单倍体植株中基因不受显隐性得影响,每一个基因得作用均能表现出来。能用来研究基因得性质及其作用。还可用于基因得剂量效应分析。

3、遗传分析

4、构建连锁图谱

双单倍体(DH)群体就是永久性群体,能有效地用于遗传图谱得构建。

能直接表达外源基因,不受显隐性影响。

5、植物基因克隆筛选

第二节花粉孢子体发育途径

概念:花粉孢子体发育途径(雄核发育途径)

花粉就是产生花粉植株得原始细胞,其第一次有丝分裂,在本质上与合子得第一次孢子体分裂相似,把花粉形成植株得途径称为花粉孢子体发育途径,也叫雄核发育途径。

一、花粉发育得阶段

花粉离体培养时,雄核发育最适宜得时期一般就是第一次有丝分裂或之前。

二、雄核发育途径

1、A途径小孢子第一次有丝分裂为非均等分裂,形成营养细胞与生殖细胞

(1)A-V途径由营养细胞重复分裂形成单倍体

(2)A-G途径由生殖细胞重复分裂形成单倍体

(3)A-VG途径(E途径)由营养细胞与生殖细胞各自独立分裂,共同形成单倍体

(4)C途径营养细胞与生殖细胞通过核融合,形成多倍体植株

2、B途径小孢子第一次有丝分裂为均等分裂,形成大小相近得两个细胞。然后由这两细胞边续分裂形