第10章食品安全检测技术.pptVIP

第31页，共69页，星期日，2025年，2月5日一、生物芯片分析步骤第32页，共69页，星期日，2025年，2月5日二、生物芯片在微生物检测中的应用采用基因芯片技术建立的水中常见致病菌的检测与鉴定方法:致病菌污染饮用水可导致多种疾病的暴发与流行，严重威胁着人类的健康。传统的细菌培养方法及生化鉴定，操作繁琐，且需要数天才能得到结果。常规PCR一次只能检出一种致病菌，对水中分离的未知菌，或有多种细菌污染的样品则显得无从下手。利用在细菌学分类上具有重要意义的16SrRNA基因作为检测的靶分子，并在其间设计检测探针，建立一套水中致病菌的基因芯片快速检测技术(4h)。（可以定性和半定量地检出致病菌。用这种芯片可以特异地检出水中副溶血弧菌、李斯特菌、耶尔森菌、变形杆菌及铜绿假单胞菌等）。第33页，共69页，星期日，2025年，2月5日基因芯片与传统方法相比其先进性①基因芯片可以对水中致病菌实现高通量、并行检测，一次实验即可得出全部结果;②操作简便、快速，整个检测4h基本可以得到结果，而传统的方法(包括仪器分析)一般需要4-7天;③特异性强、敏感性高，可以检测水中常见的致病菌。第34页，共69页，星期日，2025年，2月5日三、基因芯片检测致病菌的特点①基因芯片可以实现对样品的高通量检测：（可以同时对成千上万个样品进行检测与分析）②芯片技术可以对大量样品进行“并行”检测。③在基因芯片分析中可以采用荧光对样品进行标记。④反应体积小，降低了试剂的消耗。⑤反应物在单位体积内浓度高，反应快，缩短检测时间。⑥特异性较强基因芯片检测的特异性与传统的PCR结合探针杂交检测的特异性一致。⑦基因芯片可以完全实现自动化及快速检测。第35页，共69页，星期日，2025年，2月5日四、基因芯片技术检测致病微生物存在的问题1.基因序列信息缺乏2.基因及基因芯片技术专利的限制3.相关技术亟须改进与提高4.检测费用过高基因芯片技术是一项多学科交叉、基础研究与应用开发研究密切结合的技术，必须依靠各相关学科科学家的鼎力合作才能取得突破。基因芯片技术本身面临许多问题需要解决。第36页，共69页，星期日，2025年，2月5日五、基因芯片技术的发展前景基因芯片技术一经出现就受到各领域的高度重视，并迅速在生命科学领域、医药卫生领域，尤其是食品安全领域得到快速发展。沙门菌、李斯特菌、大肠杆菌O157等致病菌已成为危害食品安全及消费者健康的主要病原菌。快速而准确地检测这些致病菌是确保食品安全的首要任务，而基因芯片技术则为快速检测这些致病菌提供了广阔的应用前景目前，以生物芯片技术为核心的相关产业在全球迅速崛起，国际上已有数百家公司在做相关研究与开发。基因芯片从实验室走向工业化第37页，共69页，星期日，2025年，2月5日POTOMAC渗滤式蛋白芯片的设计第38页，共69页，星期日，2025年，2月5日将应用物品先准备好。检测实例第39页，共69页，星期日，2025年，2月5日在晶片盒視窗內滴加3滴試劑A，必要時用手輕晃晶片，使膜表面完全浸濕。第40页，共69页，星期日，2025年，2月5日待完全滲入後，室溫放置1分鐘，加待檢样品100μl。第41页，共69页，星期日，2025年，2月5日待血清完全滲入後，再滴加6滴試劑B。第42页，共69页，星期日，2025年，2月5日待試劑C完全滲入後，最後滴加6滴試劑D。第43页，共69页，星期日，2025年，2月5日反應完畢後0.5小時內，將晶片放入晶片閱讀系統進行閱讀分析。第44页，共69页，星期日，2025年，2月5日大淵的PBT-X2-02型生物芯片識別儀器組成。第45页，共69页，星期日，2025年，2月5日第五节生物传感器检测技术生物传感器的基本原理生物传感器是由固定化的具有分子识别功能的生物材料、换能器和信号处理放大装置组成的分析工具或系统。第46页，共69页，星期日，2025年，2月5日生物传感器的结构一般有两个主要组成部分:其一是生物分子识别元件(感受器)，是具有分子识别能力的生物活性物质(如组织切片、细胞、细胞器、细胞膜、酶、抗体、核酸、有机物分子等);其二是信号转换器(换能器)，主要有电化学电极(如电位、电流的测量)、光学检测元件、热敏电阻、场效应晶体管等。当待测物与分子识别元件特异性结合后，所产生的复合物(或光、热等)通过信号转换器转变为可以输出的电信号、光信号等，从而达到分析检测的目第47页，共69页，星期日，2025年，2月5日换能器（Transducer）感受器（Receptor）测量信号（MeasurableSignal）=