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土壤中毒死蜱残留的快速检测胶体金免疫层析法
1范围
本文件规定了土壤中毒死蜱残留快速检测的原理、试剂及材料、设备、测定步骤、结果判定与表述、
性能指标、结果判定等内容。
本文件适用于土壤中毒死蜱残留的快速定性检测。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
NY/T1121.1土壤检测第1部分:土壤样品的采集、处理和贮存
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4原理
本法采用竞争抑制免疫层析技术,样本中的毒死蜱与胶体金标记抗体结合,抑制抗体与试纸条中检
测线(T线)抗原的结合,通过T线与质控线(C线)的显色差异判定结果。
5试剂及材料
除特殊注明外,本法所用试剂均为分析纯,水为符合GB/T6682规定的二级水。
5.1试剂
5.1.1正己烷(CH,CAS号:110-54-3):色谱纯。
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5.1.2提取液:70%水溶液或有毒死蜱残留检测试剂卡配套提供。
5.2标准品
毒死蜱标准物质(Chlorpyrifos,CHClNOPS,CAS号:2921-88-2):纯度≥98%或可以使用满
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足溯源要求的商品化标准溶液。
5.3标准溶液配制
5.3.1毒死蜱标准储备溶液:精确称取10mg(精确到0.1mg)毒死蜱标准物质,用正己烷溶解,定
容至10mL,配成1000μg/mL的标准储备溶液,于-20℃保存,有效期12个月。
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5.3.2毒死蜱标准工作溶液:移取适量标准储备溶液,用正己烷逐级稀释成1μg/mL,于-20℃保存,
有效期1个月。
5.4材料
5.4.1毒死蜱残留检测试剂卡:包含密封包装,干燥阴凉处保存,使用前恢复至室温,即开即用。
5.4.2具塞离心管:15mL。
5.4.3量筒:10mL。
6设备
6.1电子天平:感量0.01g0.1mg。
6.2涡旋混合器:转速2500r/min。
6.3离心机:转速4000r/min。
6.4移液器:20~200μL,100~1000μL。
6.5胶体金分析仪:便携式智慧检测终端,可检测靶向性胶体金
7试样制备与保存
按NY/T1121.1的规定抽取具有代表性的样品,将大块样品粉碎小于2mm,用四分法缩减取样,
充分混合均匀,装入聚乙烯瓶或袋中,于-18℃条件下保存。
8分析步骤
8.1提取
称取试样2.00g(±0.05g)于15mL离心管中,加入6mL提取液,盖上盖子,涡旋混匀仪混匀2
min,离心机4000r/min离心5min,取上清液待测。
8.2测定
取出毒死蜱免疫胶体金快速检测试剂卡与测液恢复至室温,置于水平台面上。使用一次性吸管吸取
7.2中待测液的100μL(约3滴),垂直缓慢滴加于加样孔(S孔)中,液体流动时开始计时,在9min-10
min内读取检测结果,超时无效。
8.3空白试验
除不加试料外,按照8.1~8.2的规定进行平行操作。
8.4平行试验
按8.1~8.2的规定对同一试样进行平行试验测定。
8.5质控:
在空白样品加入一定量毒死蜱标准溶液(其毒死蜱含量检测下限),按8.1~8.2进行。
9结果判断及表述
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9.1目视法
阴性(-):T线显色高于或者等于C线显色,表示样本中的待测物浓度低于检测限
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