重组DNA技术的基本工具课件高二下学期生物人教版选择性必修3(1).pptx

第1节重组DNA技术的基本工具;

如果能得到这种到了晚上自己能发光的树该多好啊!

发光树萤火虫：能发光;;

1944年艾弗里等人

通过肺炎链球菌的转化实验，不仅证明了遗传物质是DNA,

还证明了DNA可以

在同种生物个体间转;

项目;

S型细菌的细胞提取物

混合

R型细菌S型细菌

第一组;

DNA具有热稳定性。加热使蛋白质变性失去活性，DNA的结构也会被破坏，但当温度降低到55℃左右时，DNA的结构会恢复，但蛋白质却不能恢复。;;

一、基因工程的概述;

探究一基因工程的理论基础和工具酶

「问题情境」

资料1:生长激素释放抑制激素可用于治疗肢端肥大症，最初只能从动物下丘脑提取，50万个羊脑才能提取5mg。科学家以质粒为载体，将相关基因转入大肠杆菌。利用改造后的工程菌生产的该激素价格降为原来的几百分之一。

(1)为什么不同生物的DNA分子能拼接起来?

提示：①DNA的基本组成单位都是四种脱氧核苷酸。

②DNA分子都遵循碱基互补配对原则。

③双链DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构。;

(2)为什么一种生物的基因可以在另一种生物细胞中表达?

提示：①基因是控制生物性状的遗传物质的结构和功能单位。

②遗传信息的传递都遵循中心法则。

③生物界共用一套遗传密码。

(3)基因工程操作导致的基因重组与有性生殖中的基因重组的主要区别是什么?

提示：①有性生殖中的基因重组是随机的，并且只能在同一物种间

进行。

②利用基因工程可以在不同物种间进行基因重组，并且方向性强，可以定向地改变生物的性状。;

一、基因工程的概述

思考：DNA双螺旋的直径只有2nm,对如此微小的分子进行操作，是

一项非常精细的工作，更需要专门的“分子工具”。

%“分子手术刀”“分子缝合针”“分子运输车”;

切割DNA分子的工具是限制性内切核酸酶，又称限制酶。

1.来源：主要来自原核生物 2.种类：数千种限制酶不是一种酶，而是一类酶。

3.作用特点：专一性;

【问题3】你能根据所掌握的知识，推测限制酶存在于原核生物

中的主要作用是什???吗?

原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，所以它

在长期的进化过程中形成了套完善的防御机制。限制

酶就是它的一种防御性工具。当外源DNA入侵时，

它会利用限制酶来切割外源DNA,使之失效，以保

证自身的安全。

为什么限制酶不切割细菌本身的DNA分子?

含某种限制酶的细菌的DNA分子不具备这种限制酶的识别序列，

或者甲基化酶将甲基转移到了限制酶所识别序列的碱基上，使

限制酶不能将其切开。;

二、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”;

4.识别序列

EcoRI5’...G-A-A-T-T-C.…3

3...C-T-TA-A-G...5

Sma5’...C-C-C-G-G-G...3

I3...G-G-G-C-C-C.….5

BamH5’...G-G-A-T-C-C…3

I3...C-C-TA-G-G.….5’

TaqI5..……T-C+G-A……3

3..…A-GC-T……5;

5.切割结果：

(1)实例1——EcoRI限制酶切割(2)实例2——SmaI限制酶切割;;

(1)用EcoRI酶切，能得到2种DNA片段；

(2)用PstI完全酶切，能得到3种DNA片段；

(3)要想获得抗病基因必须要用限制酶切几个切口?可产生几个黏性末端?要切两个切口，产生四个黏性末端。;

+-

TT

缺口怎么办

DNA连接酶一“分子缝合针”;

切

TT

AG

3

切

口

5

A

AG

3I;

AATTC

55

CTTAA

5′5′

5′3

E.coliDNA

连接酶

3′

5′;

类型;

旁栏思考(P72):DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?为什么?

相同点：都是催化磷酸二酯键形成的酶。

不同点：DNA聚合酶连接的是游离的脱氧核苷酸，需要模板；

DNA连接酶连接的是DNA片段，不需要模板。;

项目;

A.切断a处的酶为①

B.连接a处的酶为③④

C.切断b处的酶为②;

资料2:如图为不同的限制酶识别序列和切割位点。;

(4)限