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思考练习什么是广义的植物组织培养?什么是狭义的植物组织培养?什么是“外植体”?按照外植体的不同,植物组织培养可以分成几类?比较常用的是哪些?植物组织培养有哪些特点?你认为植物组织培养技术在当前的农业生产上有什么价值?为什么?12345单元二实验设备和培养条件技能目标掌握组织培养实技能目标验室的设计;掌握组织培养常用的实验仪器设备及其使用方法;掌握调控组织培养的主要环境条件。123任务导入在进行植物组织培养工作之前,首先应对工作中需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解,以便因地制宜地利用现有房屋,或新建、改建实验室。实验室的大小取决于工作的目的和规模。以工厂化生产为目的,实验室规模太小,会限制生产,影响效率。在设计组织培养实验室时,应按组织培养程序来设计,避免某些环节倒排,引起日后工作混乱。植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。要做到无菌的条件,需要一定的设备、器材和用具,同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。任务导入AGlimpseofPlantTissueCulture任务导入实验室设置及仪器
植物组织培养技术性很强,无菌条件很高,要求有最基本的实验设备条件及熟悉一般操作技术才可以进行。去分化再分化整个操作核心是无菌操作。
要点:设备设施、培养基、培养条件。
植物组织培养通常是外植体愈伤组织植株任务导入实验室设计原则:保证无菌操作,达到工作方便,防止污染。实验室组成:化学实验室[准备室]、洗涤室、无菌室(接种室)、培养室、观察室。任务导入图1-12实验室布局示意图任务讲解第一节实验室第二节设备和器材第三节培养条件第一节实验室实验室要求环境要求:理想的植物组织培养实验室应该建立在安静、清洁、远离污染源的地方,最好在常年主风向的上风方向,尽量减少污染。规模化生产的实验室最好建在交通方便的地方,便于产品的运送。实验室的建设均需考虑两个方面的问题:一是所从事的实验的性质,即是生产性的还是研究性的,是基本层次的还是较高层次的;二是实验室的规模,规模主要取决于经费和实验性质。第二节植物组织培养的发展简史20世纪初,在Schleiden和Schwann所发展起来的细胞学说的推动下,1902年德国植物学家Haberlandt提出了高等植物的器官和组织为许多细胞组成的观点,以及植物细胞全能性的理论。即植物的体细胞,在适当的条件下,具有不断分裂和繁殖,发育成完整植株的潜在能力。他首次发表了植物离体细胞培养实验的报告。第二节植物组织培养的发展简史我愿意指出:在我的培养实验中,虽然经常观察到细胞的明显生长,但从未观察到细胞分裂。发现单细胞培养的条件,将是未来培养试验的难题。在未来,人们可以成功地从营养细胞培养出人工胚。《关于单离植物细胞培养实验》Haberlandt第二节植物组织培养的发展简史直到1934年美国的White由番茄根建立了第一个活跃生长的无性繁殖系,并反复转移到新鲜培养基中继代培养,使根的离体培养实验获得了真正的成功,并在以后28年间培养了1600代。这之后,White以小麦根尖为材料,研究了光、温度、通气、pH值、培养基组成等各种培养条件对生长的影响,并于1937年建立了第一个组织培养的综合培养基,其成分均为已知化合物,包括3种B族维生素,即吡哆醇、硫胺素和烟酸,该培养基后来被定名为White培养基。第二节植物组织培养的发展简史Gautherer(1934)在研究山毛柳和黑杨等形成层的组织培养实验中,提出了B族维生素和生长素对组织培养的重要意义,并于1939年连续培养胡萝卜根形成层获得首次成功。同年,White由烟草种间杂种的瘤组织,Nobecourt由胡萝卜均建立了与上述类似的连续生长的组织培养物。因此,Gautherer,White和Nobecourt一起被誉为组织培养学科的奠基人。我们现在所用的培养方法和培养基,基本上都是由这三位科学家建立的。第二节植物组织培养的发展简史组织培养的奠基人第二节植物组织培养的发展简史40年代Skoog和崔徵在烟草茎切段和髓培养以及器官形成的研究中发现,腺嘌呤或腺苷可以解除培养基中生长素(1AA)对芽形成的抑制作用,而能诱导形成芽,从而明确了腺嘌呤与生长素的比例是控制芽和根形成的主要条件之一。即这一比例高时,产生芽;这一比例低时,则形成根;相等则不分化。第二节植物组织培养的发展简史Miller等
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