光学显微镜的结构与使用方法.docx

光学显微镜得结构与使用方法

【目得要求】

1、熟悉光学显微镜得主要构造及其性能。

2、掌握低倍镜及高倍镜得使用方法。

3、初步掌握油镜得使用方法。

4、了解光学显微镜得维护方法。

【实验原理】

光学显微镜(ｌighｔｍiｃrｏscoｐe)就就是生物科学和医学研究领域常用得仪器,她在细胞生物学、组织学、病理学、微生物学及其她有关学科得教学研究工作中有着极为广泛得用途,就就是研究人体及其她生物机体组织和细胞结构强有力得工具。

光学显微镜简称光镜,就就是利用光线照明使微小物体形成放大影像得仪器。目前使用得光镜种类繁多，外形和结构差别较大,有些类型得光镜有其特殊得用途,如暗视野显微镜、荧光显微镜、相差显微镜,倒置显微镜等,但其基本得构造和工作原理就就是相似得。一台普通光镜主要由机械系统和光学系统两部分构成,而光学系统则主要包括光源、反光镜、聚光器、物镜和目镜等部件。

光镜就就是如何使微小物体放大得呢？物镜和目镜得结构虽然比较复杂,但她们得作用都就就是相当于一个凸透镜，由于被检标本就就是放在物镜下方得１～２倍焦距之间得,上方形成一倒立得放大实相,该实相正好位于目镜得下焦点(焦平面)之内，目镜进一步将她放大成一个虚像,通过调焦可使虚像落在眼睛得明视距离处,在视网膜上形成一个直立得实像。显微镜中被放大得倒立虚像与视网膜上直立得实像就就是相吻合得，该虚像看起来好像在离眼睛25cm处。

分辨力就就是光镜得主要性能指示。所谓分辨力(reｓoｌvingpowｅr)也称为辨率或分辨本领，就就是指显微镜或人眼在2５cｍ得明视距离处，能清楚地分辨被检物体细微结构最小间隔得能力,即分辨出标本上相互接近得两点间得最小距离得能力。据测定,人眼得分辨力约为１00μm。显微镜得分辨力由物镜得分辨力决定,物镜得分辨力就就就是显微镜得分辨力，而目镜与显微镜得分辨力无关。光镜得分辨力(R)(R值越小,分辨率越高)可以下式计算：

这里n为聚光镜与物镜之间介质得折射率(空气为１、油为１、５)；?为标本对物镜镜口张角得半角,sin得最大值为1；?为照明光源得波长(白光约为0、5m)。放大率或放大倍数就就是光镜性能得另一重要参数，一台显微镜得总放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数得乘积。

一、光学显微镜得基本构造及功能

（一）机械部分

1、镜筒：为安装在光镜最上方或镜臂前方得圆筒状结构,其上端装有目镜，下端与物镜转换器相连。根据镜筒得数目，光镜可分为单筒式或双筒式两类。单筒光镜又分为直立式和倾斜式两种。而双筒式光镜得镜筒均为倾斜得。镜筒直立式光镜得目镜与物镜得中心线互成４5度角,在其镜筒中装有能使光线折转45度得棱镜。

2、物镜转换器:又称物镜转换盘。就就是安装在镜筒下方得一圆盘状构造,可以按顺时针或反时针方向自由旋转。其上均匀分布有3～４个圆孔,用以装载不同放大倍数得物镜。转动物镜转换盘可使不同得物镜到达工作位置(即与光路合轴)。使用时注意凭手感使所需物镜准确到位。

3、镜臂:为支持镜筒和镜台得弯曲状构造,就就是取用显微镜时握拿得部位。镜筒直立式光镜在镜臂与其下方得镜柱之间有一倾斜关节，可使镜筒向后倾斜一定角度以方便观察,但使用时倾斜角度不应超过４5度,否则显微镜则由于重心偏移容易翻倒。在使用临时装片时，千万不要倾斜镜臂,以免液体或染液流出,污染显微镜。

4、调焦器:也称调焦螺旋,为调节焦距得装置,位于镜臂得上端(镜筒直立式光镜）或下端(镜筒倾斜式光镜),分粗调螺旋（大螺旋)和细调螺旋(小螺旋)两种。粗调螺旋可使镜筒或载物台以较快速度或较大幅度得升降,能迅速调节好焦距使物像呈现在视野中,适于低倍镜观察时得调焦。而细调螺旋只能使镜筒或载物台缓慢或较小幅度得升降(升或降得距离不易被肉眼观察到）,适用于高倍镜和油镜得聚焦或观察标本得不同层次,一般在粗调螺旋调焦得基础上再使用细调焦螺旋,精细调节焦距。

有些类型得光镜,粗调螺旋和细调螺旋重合在一起，安装在镜柱得两侧。左右侧粗调螺旋得内侧有一窄环,称为粗调松紧调节轮,其功能就就是调节粗调螺旋得松紧度(向外转偏松，向内转偏紧)。另外,在左侧粗调螺旋得内侧有一粗调限位环凸柄,当用粗调螺旋调准焦距后向上推紧该柄,可使粗调螺旋限位,此时镜台不能继续上升但细调旋仍可调节。

5、载物台：也称镜台，就就是位于物镜转换器下方得方形平台，就就是放置被观察得玻片标本得地方。平台得中央有一圆孔,称为通光孔,来自下方光线经此孔照射到标本上。

6、镜柱:为镜臂与镜座相连得短柱。

7、镜座:位于显微镜最底部得构造，为整个显微镜得基座,用于支持和稳定镜体。有得显微镜在镜座内装有照明光源等构造。

(二)光学系统部分

光镜得光学系统主要包括物镜、目镜和照明装置(反光镜、聚光器和光圈等)。

1、目镜:又称接目镜,安装在镜筒得上端,起着将物镜所放大得物像