24秋-25春人教版生物学选择性必修3 12 第二章 专项提升课 动物细胞工程.docx

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专项提升课动物细胞工程

核心目的

1．识记动物细胞培养的条件和特点：记住动物细胞培养需要满足的条件及其作用，能描述原代培养和传代培养的操作方法，以及贴壁生长和接触抑制现象。

2．掌握动物细胞融合的方法和单克隆抗体制备过程：与植物细胞融合方法相比，灭活病毒诱导法是动物细胞特有的融合方法。单克隆抗体制备过程中的两次筛选目的不同，第一次筛选，可筛选出B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞；第二次筛选，可筛选出既能迅速大量繁殖，又能产生特定抗体的杂交瘤细胞。

3．明确核移植的原理和操作：动物体细胞核移植的原理是动物细胞的细胞核具有全能性，而不是动物细胞具有全能性。一般选择MⅡ期的卵母细胞作为受体。克隆动物的性状与提供细胞核的供体基本相同。

一、动物细胞培养的条件和过程

1．动物细胞培养的条件

营养

物质

无机物：无机盐、微量元素等；

有机物：糖类、氨基酸、促生长因子、维生素、血清等

无菌、无

毒的

环境

①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理；

②所有操作在无菌环境下进行；

③定期更换培养液，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害

温度、

pH和

渗透压

①温度：哺乳动物多以(36.5±0.5)℃为宜；

②pH：适宜pH为7.2～7.4；

③渗透压：动物细胞生长需要适宜的渗透压

气体

环境

①O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH；

②采用培养皿或松盖培养瓶置于有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养

2.动物细胞培养过程

1．下列动物细胞培养过程中属于原代培养的是()

A．把组织分散成单个细胞的过程

B．从机体取得组织分散后立即进行培养的过程

C．出现接触抑制现象后取下的细胞的培养过程

D．哺乳动物细胞在培养基中的悬浮生长过程

B解析：用胰蛋白酶使组织分散成单个细胞的过程，可以是原代培养，也可以是传代培养，A错误；原代培养是指从动物体取得的组织用胰蛋白酶分散成单个细胞后立即培养，直到细胞出现接触抑制为止，因此从机体取得组织分散后立即进行培养的过程是原代培养，B正确；出现接触抑制现象后，取下的细胞的培养过程是传代培养，C错误；哺乳动物细胞培养过程中具有贴壁生长的特点，D错误。

2．中国科学院的研究人员将人的多能干细胞通过体细胞诱导培养出全能干细胞(相当于受精卵发育3天的状态)，使得“成年”版本的细胞逆向转化为具有更多可能性的“婴儿期”版本的细胞。该全能干细胞比囊胚期细胞(相当于受精卵发育5～6天的状态)具有更强的发育潜力，是目前全球体外培养的“最年轻”的人类细胞。下列说法错误的是()

A．培养全能干细胞时需将其置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中

B．多能干细胞具有分化成多种细胞或组织的潜能，但不具有发育成完整个体的能力

C．囊胚的内细胞团将发育成胎盘和胎膜

D．病人利用自身全能干细胞诱导得到的器官进行移植可以更好地避免免疫排斥反应

C解析：培养全能干细胞过程中，需将其置于含95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中，CO2的主要作用是维持培养液的pH，A正确；多能干细胞具有分化成多种细胞或组织的潜能，但不具有发育成完整个体的能力，B正确；囊胚分为内细胞团和滋养层，其中内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，滋养层将来发育为胎膜和胎盘，C错误；自体移植不会引起免疫排斥问题，病人利用自身全能干细胞诱导得到的器官进行移植可以更好地避免免疫排斥反应，D正确。

二、动物细胞融合技术与单克隆抗体

1．动物细胞融合技术

(1)理论基础：细胞膜的流动性。

(2)诱导方法：PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。

(3)优点：细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。目前，种间、属间、科间，甚至动物和植物之间的细胞融合已获得成功。

2．单克隆抗体

(1)单克隆抗体的制备

①过程

②杂交瘤细胞的特点：既能迅速大量繁殖，又能产生单一抗体。

(2)单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高、产量大。

(3)单克隆抗体的应用

①作为诊断试剂：准确识别各种抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备。

②用于治疗疾病和运载药物：制成抗体—药物偶联物。

3．人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，下列叙述错误的是()

A．制备抗HCG单克隆抗体过程中用到的动物细胞工程技术有动物细胞培养和动物细胞融合

B．将纯化的HCG注入小鼠体内是为了从产生免疫反应小鼠的脾脏中获得能产生特定抗体的B淋巴细胞

C．图中使用的HAT培养液具有选择作用，可以让能合成抗HCG抗体的细胞大量增殖

D．在小鼠腹水中收集抗HCG单克隆抗体时，需要