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流式细胞术原理和新应用
游东生
BeckmanCoulter公司上海代表处
一、流式细胞仪是什么,能做什么
®流式细胞仪是细胞组学的定量工具
•细胞相对定量(%)
•细胞绝对定量(细胞/ul)
•细胞膜蛋白表达定量(蛋白分子/细胞)
•可溶性蛋白绝对定量(g/ml)
®分选型流式细胞仪是细胞组纯化工具
A
B
C
对细胞进行定量和分选的MARKER
•蛋白表达(有或无,多或少)
•DNA含量多少
•生物大分子暴露
•细胞器状态
•代谢或生理差异
A
B
C
D
MARKER可以在细胞的任何部位
细胞膜直接标记
细胞器直接
细胞浆打孔
细胞核打孔或直接
代谢ANYWAY
流式细胞仪对目标细胞的识别需要借助对
MARKER进行标记的荧光素
你无法改变的荧光素/流式细胞仪的东西:
激发波长
发射波长
激光
荧光通道
二、流式细胞仪在生命科学研究和
实践中的意义
•CYTOME:细胞组,包括细胞结构、亚细胞结构和细胞功
能元件
•CYTOMICS:细胞组学,研究异质性细胞组的科学,特别
是以生物信息学方法研究单细胞分子水平由基因、蛋白和
环境引起的细胞异质性
•PROTEOME:蛋白组,指单个单位生命组分(细胞器、
细胞、组织、器官乃至生命个体等)所有蛋白构成
•PROTEOMICS:蛋白组学,研究异质性生命组分蛋白组
的科学,特别是由基因和环境引起的变化。
系统生物学
干扰RNA(RNAi)
信号传导蛋白(CellSignalling)
环境-细胞组-基因/蛋白组
相互作用网络
Growthincellbasedassays以细胞为目标
Past5yearsUncertainInDevelopment
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