生物方法 技术 试剂流式细胞术的基础和新应用.pdf

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流式细胞术原理和新应用

游东生

BeckmanCoulter公司上海代表处

一、流式细胞仪是什么,能做什么

®流式细胞仪是细胞组学的定量工具

•细胞相对定量(%)

•细胞绝对定量(细胞/ul)

•细胞膜蛋白表达定量(蛋白分子/细胞)

•可溶性蛋白绝对定量(g/ml)

®分选型流式细胞仪是细胞组纯化工具

A

B

C

对细胞进行定量和分选的MARKER

•蛋白表达(有或无,多或少)

•DNA含量多少

•生物大分子暴露

•细胞器状态

•代谢或生理差异

A

B

C

D

MARKER可以在细胞的任何部位

细胞膜直接标记

细胞器直接

细胞浆打孔

细胞核打孔或直接

代谢ANYWAY

流式细胞仪对目标细胞的识别需要借助对

MARKER进行标记的荧光素

你无法改变的荧光素/流式细胞仪的东西:

激发波长

发射波长

激光

荧光通道

二、流式细胞仪在生命科学研究和

实践中的意义

•CYTOME:细胞组,包括细胞结构、亚细胞结构和细胞功

能元件

•CYTOMICS:细胞组学,研究异质性细胞组的科学,特别

是以生物信息学方法研究单细胞分子水平由基因、蛋白和

环境引起的细胞异质性

•PROTEOME:蛋白组,指单个单位生命组分(细胞器、

细胞、组织、器官乃至生命个体等)所有蛋白构成

•PROTEOMICS:蛋白组学,研究异质性生命组分蛋白组

的科学,特别是由基因和环境引起的变化。

系统生物学

干扰RNA(RNAi)

信号传导蛋白(CellSignalling)

环境-细胞组-基因/蛋白组

相互作用网络

Growthincellbasedassays以细胞为目标

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