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蛋白质免疫印迹技术实验研究与进展

目录

一、内容综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1蛋白质免疫印迹技术概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.2蛋白质免疫印迹技术研究意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

1.3蛋白质免疫印迹技术发展历程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

二、蛋白质免疫印迹技术原理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

2.1蛋白质样品制备方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

2.2蛋白质电泳分离技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

2.3蛋白质转移技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

2.3.1主动转移．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

2.3.2电动转移．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

2.4蛋白质抗体孵育方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

2.4.1一抗孵育．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

2.4.2二抗孵育．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

2.5蛋白质信号检测方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

2.5.1化学发光检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

2.5.2显微镜检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

2.5.3其他检测方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

三、蛋白质免疫印迹技术实验优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

3.1样品前处理优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

3.1.1蛋白质提取方法改进．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

3.1.2蛋白质变性剂选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

3.2电泳条件优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

3.2.1凝胶浓度选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

3.2.2电泳缓冲液优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

3.3转膜条件优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

3.3.1转膜条件选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

3.3.2转膜效率评估．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40

3.4抗体应用优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

3.4.1抗体选择策略．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42

3.4.2抗体浓度优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43

3.5信号检测优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44

3.5.1检测试剂选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45

3.5.2检测条件优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．47

四、蛋白质免疫印迹技术新进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48

4.1高通量蛋白质免疫印迹技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．49

4.2蛋白质免疫印迹技术与质谱联用技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．52

4.3蛋白质免疫印迹技术在临床诊断中的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．54

4.4蛋白质免疫印迹技术在基础研究中的应用．．．．．