3.2基因工程的基本操作程序 课件（共30张PPT) 人教版（2025）高中生物学选择性必修3（含音频+视频）.pptxVIP

3.2基因工程的基本操作程序;1.酶切;;DNA连接酶;①PCR法（注意引物的设计）

②双抗生素抗性基因鉴定

③测序法

;质粒的多克隆位点整合在lacZ基因中，在多克隆位点插入外源目的基因，破坏了lacZ基因的结构，大肠杆菌形成白色的克隆。

否则形成蓝色克隆。;;1.将目的基因导入植物细胞;两次拼接：第一次拼接是将目的基因拼接到Ti质粒的T-DNA上；第二次拼接(非人工操作)指被插入目的基因的T-DNA拼接到受体细胞染色体的DNA上。;（2）花粉管通道法;2.将目的基因导入动物细胞;3.将目的基因导入微生物细胞;实例：利用转基因大肠杆菌生产药物;;DNA分子杂交;抗原—抗体杂交;鉴定——;基因编辑;②?Cre-lox介导的基因组特定位点重组

1、两个loxP位点位于同一条DNA链上且方向相同，Cre重组酶敲除loxP间的序列；

2、两个loxP位点位于同一条DNA链上且方向相反，Cre重组酶诱导loxP间的序列翻转；

3、两个loxP位点位于不同的DNA链或染色体上，Cre重组酶诱导两条DNA链发生交换或染色体易位。

;DNA的粗提取与鉴定;;资料：当氯化钠的物质的量浓度为2mol／L时，DNA的溶解度最大;将DNA和蛋白质进一步分离;3、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性;4、DNA的鉴定;30g洋葱加10ml研磨液充分研磨

过滤，4℃放置几分钟，取上清