常用化学药品检验方法检验仪器的使用.pptxVIP

常用化学药品检验方法

检验仪器的使用化学药品检验室

内容：高效液相色谱仪器（高效液相）色谱理论滴定分析法

高效液相色谱仪高效液相色谱仪一、结构示意图.二、部件介绍 一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。 现在的仪器还一般配置有在线脱气机、自动进样器、柱温箱等。制备型HPLC仪还配备有自动馏分收集装置。

泵恒压泵、恒流泵。恒流泵按结构又可分为螺旋注射泵、柱塞往复泵和隔膜往复泵。目前应用的基本上是柱塞往复泵。（单元泵、四元泵、高压二元泵）柱塞往复泵使用时的注意事项：1防止固体微粒进入泵体造成磨损。2流动相不应含有对泵体造成腐蚀的化学物质。3泵空转也会磨损柱塞，防止流动相跑空。4压力过高会使密封环变形，产生漏液。5防止流动相中析出盐晶，应开启柱塞冲洗功能。

进样器主要部件为定量环及六通阀。使用时应注意：样品溶液进样前必须用0.45μm滤膜过滤，以减少微粒对进样阀的磨损进样量应不大于定量环体积的50%每次分析结束后应冲洗进样阀，现在大部分进样器能自动实现此功能。部分自动进样器还能实现柱前衍生化等操作。（Agilent）

色谱柱色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好、分析速度快等。使用色谱柱时应注意事项：1避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。2应逐渐改变溶剂的组成，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。3一般不能反冲，否则会迅速降低柱效。4使用适宜的流动相（尤其是pH），以避免固定相被破坏。5流动相应先脱气，避免气泡进入柱体。6测试基质复杂的样品时，应用保护柱。7定期用强溶剂冲洗色谱柱，清除驻留在柱内的杂质。8保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇后塞紧。

高效液相色谱的主要类型及其分离原理类型（按固定相分子聚集状态和分离机制分）：分配色谱(液-液色谱)；吸附色谱(液-固色谱)；离子交换色谱；空间排阻色谱；亲和色谱等。一、液-液色谱（一）反相键合相色谱化学键合相：利用化学反应将固定液的官能团键合在载体表面特点：不易流失热稳定性好化学性能好载样量大适于梯度洗脱

02固定相：极性小的烷基键合相C8柱，C18柱（十八烷基Octadecylsilyl，简称ODS）03流动相：极性大的甲醇-水或乙腈-水流动相极性固定相极性（RP）底剂+有机调节剂（极性调节剂）例：水（缓冲盐溶液）+甲醇，乙腈，THF疏溶剂理论流动相与溶质排斥力越强，作用时间↑，k↑，组分tR↑流动相与溶质排斥力越弱，作用时间↓，k↓，组分tR↓011分离机制：分配+吸附

（二）正相键合相色谱4．流动相极性与k的关系：流动相极性↑，洗脱能力↓，k↑，组分tR↑5．出柱顺序：极性大的组分先出柱极性小的组分后出柱6．适用：非极性~中等极性组分1．分离机制：溶质分子与固定相之间定向作用力、诱导力、或氢键作用力（有分配和吸附两种说法）2．固定相：极性大的氰基、氨基、二氨基、芳硝基等键合相3．流动相：极性小（同LSC）底剂+有机极性调节剂例：正己烷+氯仿-甲醇，氯仿-乙醇

4．流动相极性与k的关系：流动相极性↑，洗脱能力↑，组分tR↓，k↓5．出柱顺序：结构相近组分，极性小的组分先出柱极性大的组分后出柱6．适用：氰基键合相与硅胶的柱选择性相似（极性稍小），分离物质也相似氨基键合相与硅胶性质差别大，碱性，分析极性大物质、酚、羧酸、核苷酸、糖类、氨基酸等（也可用作反相固定相，氨基柱不能用于分离甾酮、还原糖）

二.液-固色谱法（或液-固吸附色谱法）1.特点：流动相为液体，固定相为吸附相。2.分离机制：Xm+nSa=Xa+nSmK=[Xa][Sm]n/[Xm][Sa]n3.结论：显然，分配系数大的组分，吸附剂对它的吸附力强，保留值就大。4.作用：a.适用分离相对分子质量中等油性试样。b.对具有不同官能团的化合物和异构体有较高的选择性。缺点：由于非线性等温吸附常引起峰的拖尾现象。

分离机制；离子与离子之间的电荷吸引力适用范围；凡能在溶剂中电离的物质一般均可用该法进行分离。交换：KX=[-NR4+X-][Cl-]/[-NR4+Cl-][X-]离子交换色谱法01结论