植物组织培养的基本方法.pptx

植物组织培养的基本方法;灭菌;灭菌就是指用物理或化学得方法,杀死物体表面和孔隙内得一切微生物或生物体,即把所有生命得物质全部杀死。

消毒,她指杀死、消除或充分抑制部分微生物,使之不再发生危害作用,显然经过消毒,许多细菌芽孢、霉菌得厚垣孢子等不会完全杀死,即消毒后得环境里、物品上还有活着得微生物。

而通过严格灭菌得操作空间(接种室、超净台、等)和使用得器皿,以及操作者得衣着和手都不带任何活着得微生物。在这样得条件下进行操作,就叫做无菌操作。;常用得灭菌方法可分为物理得和化学得两类。

物理方法如干热(烘烧和灼烧)、湿热(常压或高压蒸煮)、射线处理(超声波、微波)、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施。

化学方法就是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏儿、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。

这些方法和药剂要根据工作中得不同材料不同目得适当选用。;1、培养基用湿热灭菌

培养基在制备后得24小时内完成灭菌工序

按容器大小不同,保压时间有所不同(下表)。;2、用于无菌操作得器械采用灼烧灭菌

在无菌操作时,把镊子、剪子、解剖刀等浸入95%得酒精中,使用之前取出在酒精灯火焰上灼烧灭菌。冷却后,立即使用。操作中可采用250或500ml得广口瓶,放入95%得酒精,以便插入工具。

3、玻璃器皿及耐热用具采用干热灭菌

干热灭菌就是利用烘箱加热到160～180℃得温度来杀死微生物。通常