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内镜病理固定技术规范与操作要点
演讲人：
日期:
目录
CATALOGUE
02
设备与标本处理
03
病理诊断关联要点
04
操作注意事项
05
质量控制体系
06
临床应用与案例
01
技术原理概述
01
技术原理概述
PART
内镜病理固定
固定剂选择
指在内镜检查中，将取得的活检组织或细胞学标本，通过特定方式进行处理和固定，以保持其形态、结构和成分的完整性，便于后续的病理学检查和诊断。
常用的固定剂包括甲醛、乙醇、丙酮等，不同固定剂对组织细胞的固定效果和后续染色等有一定影响。
内镜病理固定定义
固定目的与意义
提高诊断准确性
通过固定使组织细胞形态保持稳定，防止因脱水、变形、自溶等因素影响病理诊断的准确性。
有利于后续操作
保持组织形态
良好的固定能够使细胞结构更加清晰，有利于病理学医生对组织细胞进行准确的识别和诊断。
固定后的组织样本更加稳定，便于进行后续染色、切片等处理。
在内镜检查中，通过活检钳等工具采集疑似病变的组织样本。
将采集的样本放入生理盐水中进行清洗，去除血液、黏液等杂质，以免影响固定效果。
将清洗后的样本放入固定液中，确保组织细胞充分浸没，固定时间根据组织类型和固定剂种类而定。
固定后的组织样本需进行脱水和透明处理，以便后续染色和观察。
基本操作流程
样本采集
清洗与处理
固定操作
脱水与透明
02
设备与标本处理
PART
如活检钳、镊子等，适用于小标本或易碎组织的固定。
手工固定设备
如真空吸引器、恒压固定器等，适用于较大标本或需要均匀固定的组织。
机械固定设备
如甲醛蒸气固定器、丙酮固定器等，适用于需要特殊化学处理的组织。
化学固定设备
常用固定设备类型
固定液选择标准
适用性
根据组织类型和病理需求选择合适的固定液，确保组织形态和抗原性的保存。
01
固定液应稳定且不易挥发，避免对组织产生不良影响。
02
安全性
固定液应无毒或低毒，对人体和环境无害。
03
稳定性
标本预处理步骤
清洗
用生理盐水或其他适当溶液清洗标本，去除血渍、黏液等杂质。
01
切割
将标本切割成适当大小，便于固定和后续处理。
02
脱水
用梯度酒精或其他脱水剂进行脱水处理，以避免组织在固定过程中变形或变质。
03
03
病理诊断关联要点
PART
细胞内蛋白质、酶、核酸等化学成分不丢失或破坏。
细胞内成分保存
保持组织原有定位，不出现移位或混淆。
组织定位
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04
细胞形态、组织结构保存完整，无明显挤压变形。
组织形态保存
确保后续染色时组织着色均匀，无明显色差。
染色效果
组织学特征保存要求
常见病变固定差异
如肝、肾等，固定后组织变硬，颜色变深。
实质性器官
如胃、肠等，固定后空腔器官保持原形态，内部空虚。
空腔器官
固定后脂肪组织保持原有形态，不易变形。
脂肪组织
固定后神经组织变得更加坚硬，颜色变深。
神经组织
诊断结果影响要素
固定液种类及浓度
固定温度
固定时间
组织厚度
不同固定液对组织固定效果不同，浓度过高或过低均会影响固定效果。
固定时间过短会导致组织固定不充分，影响后续染色和观察；过长则会使组织过度硬化，同样影响诊断结果。
固定温度过高会导致组织细胞破坏，过低则会影响固定速度。
组织过厚会导致固定液渗透不均，影响固定效果。
04
操作注意事项
PART
标准化操作规范
固定液浓度过高或过低，均会影响组织细胞的形态和结构，甚至导致细胞变形或破坏。
严格掌握固定液浓度
固定时间不足会导致组织固定不彻底，影响后续染色和诊断。但固定时间过长，也会使组织变硬变脆，影响制片效果。
固定温度过高或过低，都会影响固定效果。通常在室温下进行固定，避免高温或低温环境。
固定时间要充足
确保固定液能够均匀浸透到组织内部，避免局部固定不良。
固定液要均匀浸透
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03
保持适宜的温度
组织块过大会导致固定液无法充分浸透，影响固定效果。在取样时应尽量控制组织块的大小。
组织在固定前应避免脱水，以免影响细胞形态和结构的观察。在取样后应立即放入固定液中。
不同的组织类型和实验要求，需要选择不同的固定液。应根据实际情况选择合适的固定液。
固定液如果受到污染，会影响组织的固定效果和后续染色效果。应严格按照操作规程进行操作，避免污染。
常见失误规避方法
避免组织块过大
避免组织脱水
正确选择固定液
避免固定液污染
应急问题处理方案
固定液不足或过多
如果固定液不足，应及时补充；如果固定液过多，应及时吸去多余部分，避免浪费和影响固定效果。
组织固定效果不佳
组织块脱落或破碎
如果发现组织固定效果不佳，应及时重新固定，并检查固定液浓度、时间和温度等条件是否合适。
在组织块脱落或破碎时，应及时进行补救，如重新取样或采用其他方法进行处理。同时，应分析原因并采取措施避免类似情况再次发生。
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质量控制
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