《六堡茶 致嗅杂环化合物的测定 顶空-固相微萃取气相色谱-质谱法 》.docx

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六堡茶致嗅杂环化合物的测定

顶空-固相微萃取气相色谱-质谱法

1范围

本文件界定了六堡茶中5种挥发性关键香气的相关术语和定义，规定了六堡茶中5种致嗅杂环化合物顶空-固相微萃取气相色谱-质谱法，包括方法原理、试剂和材料、仪器和设备、样品制备与保存、测定步骤、数据处理以及准确度和精密度等内容。

本文件适用于六堡茶中致嗅杂环化合物含量的测定。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

5种挥发性关键香气5volatilekeyaromas

成分包括：2，6-二甲基吡嗪、三甲基吡嗪、四甲基吡嗪、吲哚和3-甲基吲哚。

4方法原理

利用固相微萃取纤维顶空吸附富集六堡茶样品中的2，6-二甲基吡嗪、三甲基吡嗪、四甲基吡嗪、吲哚和3-甲基吲哚后用气相色谱质谱联用仪分离测定，内标法定量。

5试剂和材料

5.1试剂

5.1.1除非另有说明，本方法所用试剂分析纯以上试剂。

5.1.2超纯水：质谱检验无干扰成分。

5.1.3甲醇（CH3OH）：色谱纯。

5.1.4氯化钠（NaCl）：优级纯，经450℃烘烤2h后置干燥器内备用。

5.1.5标准物质：2，6-二甲基吡嗪（C7H9N）、三甲基吡嗪（C7H10N2）、四甲基吡嗪（C8H12N2）、吲哚（C8H7N）、3-甲基吲哚（C9H9N），纯度≥95%，或使用有证标准物质。

5.2试剂配制

5.2.1标准储备溶液：称取2，6-二甲基吡嗪、三甲基吡嗪、四甲基吡嗪、吲哚和3-甲基吲哚各10.0mg，分别置于100mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，质量浓度均为100mg/L。将标准储备溶液置于聚四氟乙烯封口的螺口瓶中或密闭安瓿瓶中，尽量减少瓶内的液上顶空，避光于0℃~4℃冷藏保存。

5.2.2标准中间溶液：分别用甲醇将2，6-二甲基吡嗪、三甲基吡嗪、四甲基吡嗪、吲哚和3-甲基吲哚标准储备溶液稀释成质量浓度为10.0mg/L的标准中间溶液。将标准中间溶液置于聚四氟乙烯封口的螺口瓶中或密闭安瓶中，尽量减少瓶内的液上顶空，避光于0℃~4℃冷藏保存，使用前要检查溶液是否挥发。

5.2.3标准混合使用溶液：将标准中间溶液放至室温，用甲醇或纯水将10.0μg/L的2，6-二甲基吡嗪、三甲基吡嗪、四甲基吡嗪、吲哚和3-甲基吲哚标准中间溶液稀释成10.0μg/L的标准混合使用液。现用现配。

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5.2.4内标物：2-异丁基-3-甲氧基吡嗪（C9H14N2O），纯度＞95%，或使用有证标准物质。

5.2.5内标储备溶液：称取2-异丁基-3-甲氧基吡嗪标准物质10.0mg，置于100ml，容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，质量浓度为100mg/L。将内标储备溶液置于聚四氟乙烯封口的螺口瓶中或密闭安瓶中，尽量减少瓶内的液上顶空，避光于0℃~4℃冷藏保存。

5.2.6内标中间溶液：用甲醇将2-异丁基-3-甲氧基吡嗪储备溶液逐级稀释成质量浓度为10.0mg/L的内标中间溶液。将内标中间溶液置于聚四氟乙烯封口的螺口瓶中或密闭安瓿瓶中，尽量减少瓶内的液上顶空，避光于0℃~4℃冷藏保存，使用前要检查溶液是否挥发。

5.2.7内标使用溶液的配制：将内标中间溶液放至室温，用甲醇或纯水将10.0mg/L的2-异丁基-3-甲氧基吡嗪中间溶液稀释成质量浓度为50.0μg/L的内标使用溶液。现用现配。

6仪器和设备

6.1气相色谱质谱联用仪，质谱仪使用电子电离源（EI）方式离子化，标准电子能量为70eV。

6.2全自动顶空固相微萃取装置能直接连接到色谱部分，并能自动启动色谱。

6.3纤维萃取头：85μmCarboxen/PDMS（聚二甲基硅氧烷）的纤维萃取头或相当者。

6.4色谱柱30m×0.25mm，0.25μm，填料为聚乙二醇类；或其他等效色谱柱。

6.5固相微萃取专用衬管（78.5mm×6.3mm，0.75mm）。

6.6固相微萃取瓶（SPME）：20mL棕色螺旋口顶空瓶，具聚四氟乙烯衬垫和磁性螺旋盖。

6.7分析天平：感量0.1mg和0.01g。

7样品制备与保存

取100g样品，粉碎后过60目筛处理后，混合均匀，常温保存。

8测定步骤

8.1样品处理

称取粉碎后样品约0.1g（准确至0.0001g）。置于20mL棕色玻璃瓶，依次3g氯化钠（5.1.4），混匀。10.0mL超