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河南欧诺生物科技有限公HenanOunuoBiotechnologyCo.LTD
食用油中苯并(a)芘(BaP)ELISA检测试剂盒使用说明书
(货号:Ounuo95001)检测限:1.5μg/kg定量区间:2-20μg/kg
本产品可以采用单点定标,即点1个标准品实现定量分析,最大可实现47个样本的检测。采用单点定标
时,数据分析请来电索取专门的Excel数据分析软件
1.样本前处理(动植物性食用油脂,如菜籽油、大豆油、花生油、玉米油、调和油等)
需要但未提供的试剂和器皿如下:
(1)二氯甲烷,分析纯【提示】
(2)正己烷,分析纯BaPSPE柱(货号:FS-06001)随试剂盒一起配发
(3)甲醇,分析纯前处理所需试剂A、试剂B、试剂C配套在BaPSPE
(4)去离子水柱中
(5)5mL圆底或锥底玻璃离心管
(6)2ml玻璃进样瓶或者5ml圆底玻璃试管(一次性)
(7)5mL有机玻璃离心管架(24孔),1个
(8)17*17*10cm瓷盘,1个
试剂配制
预处理试剂:取1管试剂A,加入到1瓶试剂B中,剧烈震荡使其完全溶解,备用【配制好的预处理试剂
呈白色半透明状,于2-8℃保存有效期10天】
1.1预处理
1)称取0.4±0.005g油样于5mL玻璃离心管中,加入0.4mL预处理试剂混匀;
2)室温静置5min(离心管斜躺在桌面上)
3)加入0.4mL去离子水、1mL正己烷剧烈振荡2min;静置分层约1min(此时可以先活化柱子)
1.2过SPE柱【注意】
1)活化:依次采用1mL二氯甲烷、1mL正己烷过柱不小心取到下层水相,可以将
2)上样:取1mL上层待净化液加入柱中(见1.1预处理-3));移液器垂直后排出水相即可
3)淋洗:依次用1mL正己烷、1mL试剂C淋洗,最后吹空气3s;
4)解吸:加入1mL二氯甲烷解吸(流速1mL/min),收集全部解吸液于2mL玻璃进样瓶中
5)浓缩及复溶:40℃水浴氮吹干;加入1mL甲醇涡旋15s;取0.1mL甲醇复溶液,再加入
0.1mL样本稀释液涡旋15s
2.操作步骤
实验前,请将检测试剂盒从2-8℃冰箱中取出,于室内温度20-28℃下平衡1小时!
1)取出平衡后的适量板条,其余放回铝膜袋中;
2)依次:加50μL标准品/样本于相应微孔中;加50μL酶结合物和50μL抗体至所有微孔;
3)盖上板贴,于20-28℃下,孵育20分钟;倒出微孔中液体;
4)将洗涤液注满微孔浸泡15s倒出,重复2次;
5)加100μL底物至微孔中,于20-28℃下,孵育10分钟;
6)加100μL终止液至微孔中,于450/630nm波长下,读数
3.结果分析
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河南欧诺生物科技有限公HenanOunuoBiotechnologyCo.LTD
1)结合率计算公式
A
B100%i
A
0
其中,
B:为i样本或浓度点的结合率;
A:为i样本或浓度点的吸光度;i
A:为零标准孔的吸光度;
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