微囊藻毒素ELISA说明书-OUNUOAT91001(1).pdf

河南欧诺生物科技有限公司

HenanOunuoBiotechnologyCo.LTD

微囊藻毒素ELISA4.需要的仪器、试剂

1）仪器

检测试剂盒酶标仪450nm（iELisa全自动酶标仪或相当者）

离心机

货号：OunuoAT91001微量移液器20μL～200μL，100μL～1000μL

50mL离心管

8道微量移液器

酶标板振荡器

1.概要天平：感量0.01g

随着中国水体的富营养化程度逐渐加剧，蓝藻5.样品处理

水华和赤潮的发生逐渐增加。80%的蓝藻水华都可5.1水样品饮用水、地表水

以检测出次生代谢产物微囊藻毒素1）直接吸取50μL澄清样品用于检测。

（microcystins，MCs），它对水体环境和人群健康稀释倍数：1

的危害已成为全球关注的重大环境问题之一。微囊5.2海水

藻毒素为七肽单环肝毒素，结构中存在着环状结构1）吸取100μL澄清样品与900μL样本稀释液，混

和间隔双键，因而具有相当的稳定性，它能够强烈匀；

抑制蛋白磷酸酶的活性，当细胞破裂或衰老时毒素2）直接吸取50μL澄清样品用于检测。

释放进入水中，同时它还是强烈的肝脏肿瘤促进稀释倍数：5（由于海水存在基质效应问题，根据

剂。MC是一种单环七肽物质，具有明显的肝细胞大量的数据支撑，稀释因子由10变更为5）

毒性。由于多肽中两种可变氨基酸组成的不同，具6．酶联免疫分析程序

有多种异构体。其中存在最普遍、含量最多的是6.1测定之前注意事项

MC-LR，MC-RR，MC-YR这3种微囊藻毒素。研1)使用前将所有试剂平衡至室温（20-25℃）。

究表明，MC-LR的急性毒性最强，MC-YR次之，2)使用后迅速将试剂放入2-8℃冷藏。

MC-RR最弱。3)在ELISA分析中的再现性，很大程度上取决于

2.原理洗板的一致性，正确的洗板操作是ELISA测定

本试剂盒采用间接竞争法。酶标板微孔中预包程序中的要点。

被微囊藻毒素抗原，样品中残留的微囊藻毒素与微4)所有孵育过程应避免阳光直射，并按要求用盖

孔板上的抗原竞争微囊藻毒素抗体，加入酶标二抗板覆盖住酶标板。

后，用TMB显色，吸光值与样品中微囊藻毒素含6.2溶液的配制

量成负相关。1)洗涤液的配制：将浓缩洗涤液用去离子水稀释

3.试剂盒组成10倍后使用（1份浓缩洗涤液加9份蒸馏水）。

1)包被有抗原的96微孔板：1块（96孔，12条×86.3测定程序

孔）1)将足够标准品和样品所用数量的孔条插入酶

2)高浓度标准品100ng/mL：