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基于CRISPR技术的作物改良体系构建与伦理风险防范
目录
一、内容简述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.1.1作物改良的必要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5
1.1.2基因编辑技术的兴起．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6
1.1.3CRISPR技术的优势与应用前景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7
1.2国内外研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9
1.2.1国外CRISPR技术在作物改良中的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12
1.2.2国内CRISPR技术在作物改良中的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12
1.2.3现有研究的不足与挑战．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14
1.3研究内容与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15
1.3.1研究目标与内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16
1.3.2技术路线与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17
1.3.3预期成果与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
二、CRISPR技术原理及其在作物改良中的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．26
2.1CRISPR技术的基本原理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27
2.1.1CRISPR系统的组成．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28
2.1.2CRISPRCas9的识别与切割机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29
2.1.3基因编辑的修复途径．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30
2.2CRISPR技术在作物改良中的优势．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35
2.2.1高效性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36
2.2.2精准性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37
2.2.3可控性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38
2.3CRISPR技术在作物改良中的应用案例．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39
2.3.1抗病性改良．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40
2.3.2耐逆性增强．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42
2.3.3营养品质提升．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43
2.3.4产量提高．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44
三、基于CRISPR技术的作物改良体系构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45
3.1作物基因编辑平台搭建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46
3.1.1载体系统的构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．47
3.1.2编辑工具的开发．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．52
3.1.3演化体系的建立．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．53
3.2核心作物品种的基因编辑．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．53
3.2.1目标基因的筛选．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．55
3.2.2基因编辑方案的设计．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．56
3.2.3突变体的筛选与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．57
3.3作物改良体系的优化与完善．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．60
3.3.1编辑效率的提升．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．
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