医学代谢组学技术与研究系列讲座08基于LC-MS的代谢组学技术与应用.pptx

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解螺旋 | 陪伴医生科研成长知识金牌01LC-MS介绍02LC-MS实验与分析流程03医学代谢组学应用案例CONTENTS课程目录

LC-MS介绍01

知识金牌代谢组学检测技术的挑战技术挑战仪器性能实验效果高扫描速度高灵敏度高分辨率宽动态范围重现性好耐用和易用性解螺旋|陪伴医生科研成长分离复杂样品检测低丰度物质代谢物定性准确物质含量跨度大分析结果稳定可靠简单耐用速度快：最短时间采集最多信息看得见：低丰度物质分得开：质量相近物质范围宽：兼顾高低含量测得准：准确可靠易上手：学习维护简单不同类型的仪器与不同的长处和短处，但目前为止还很难有一种仪器能满足以上所有要求，所以代谢组技术选择需要多方面考虑。

知识金牌LC-MS基本定义解螺旋|陪伴医生科研成长定义：LC-MS(液质联用)是液相色谱-质谱联用的简称，是将液相色谱仪(LC)与质谱仪(MS)通过适当接口相结合，借助计算机技术，进行联用分析的技术。即：先通过液相色谱将复杂混合物分离成简单组分后进入质谱进行分析检测，是目前快速发展成熟的代谢组学技术。LC（液相色谱）：利用物质在流动相和固定相之间的吸附能力、离子交换 作用以及分子大小等差异来实现混合物的分离，用于代谢组实验的色谱常 为加压液相色谱即高压液相色谱（HPLC，也称高效液相色谱）

知识金牌色谱分类液固色谱离子交换色谱液液色谱色谱反相色谱（RPLC）一般采用非极性固定相（如C8，C18）结合极性的溶剂（比如水）并加入与水互溶的甲醇、乙腈、丙酮等有机溶剂以调节保留时间，常用于分离非极性或极性较弱的物质的分离，是现在应用最广泛的色谱类型排阻色谱离子对色谱正相色谱（NPLC），一般采用极性固定相（如聚乙二醇、氨基）结合非极性的疏水性溶剂（比如烷烃类），常用于分离中等极性或极性较强的物质（如酚类）解螺旋|陪伴医生科研成长

知识金牌LC-MS常见离子源及特点解螺旋|陪伴医生科研成长电喷雾（ESI）大气压化学电离（APCI）常形成多电荷离子只形成单电荷离子离子在液体中形成离子在气态中形成适合极性或半极性化合物适合弱极性或半极性化合物适合热不稳定化合物适合热稳定化合物蛋白质、多肽等大分子代谢物小分子

知识金牌1978年，首次用于生物样品的药物分析1991年，API-LC-MS用于药物开发1999年，API-Q-TOF（LC-MSMS）投放市场在离子源、色谱柱、压力、质谱方面都有非常大的进展，广泛应用于生物医学、化工、食品检测等多个领域030102解螺旋|陪伴医生科研成长NOWLC-MS发展历程

知识金牌技术特点解螺旋|陪伴医生科研成长相对于GC-MS，LC-MS可以分离极性的、离子化的、不易挥发的和热不稳定的化合物，具有更广泛的用途；样品的预处理更为简单，分离类型更为丰富，可以根据检测要求选择不同的分离色谱类型和质谱类型；LC-MS的线性范围更广，对于浓度差别较大的物质可以实现较好的分离和定量；LC/MS具有良好的选择性和灵敏度，既能得到分子离子，又有更细致精确的多级质谱信息，可以实现对未知代谢物的鉴定。

知识金牌代表性仪器1ABSCIEX5600-Triple-TOF:2012年上市，代谢组应用最广泛的LC-MSMS系统之一，属于Q-TOF类型，更换不同的色谱仪即可以进行代谢物等小分子分离也可以进行蛋白等大分子分离。OSI-SMMS拟靶向代谢组数据库即采用此款仪器开发。目前该型号的最新款仪器为ABSCIEX6600，带有离子淌度分离技术，在手性化合物分离方面也有独特优势。解螺旋|陪伴医生科研成长

知识金牌代表性仪器2，WatersXevoG2-XSQTOF:2014年上市Waters公司目前最高端的Q-TOF系统，配上Waters的UPLC（业内颇受认可的UPLC），结合Waters的QI数据处理软件，是进行发现代谢组学（非靶向代谢组学）研究的利器。解螺旋|陪伴医生科研成长

知识金牌代表性仪器3Thermo-Q-Exactive(简称QE):2012年上市，基于独特的四极杆-静电场轨道阱（Orbitrap）技术,适合于非靶向代谢组的分析，同时，该款仪器配置上纳升液相系统，也非常适合于蛋白质等大分子的分离鉴定。解螺旋|陪伴医生科研成长

知识金牌代表性仪器4ABSCIEX6500-QQQ或Q-Trap:2012年上市，有QQQ以及Q-Trap两种类型,适合于靶向代谢组的分析，其