微生物的实验室培养原创.pptVIP

⑵稀释涂布平板法：a.梯度稀释菌液：b.涂布平板：滴稀释菌液不超过0.1ml各梯度分别涂布3个平板1个不涂布作空白对照稀释103倍稀释104倍稀释105倍第30页，共38页，星期日，2025年，2月5日第31页，共38页，星期日，2025年，2月5日关于微生物的实验室培养原创第1页，共38页，星期日，2025年，2月5日微生物的类群原生生物：原核生物:真菌:病毒:如酵母菌单细胞的动植物如草履虫、单细胞藻类等微生物包含了除植物界和动物界以外的所有生物无细胞结构真核细胞细菌、蓝藻原核细胞第2页，共38页，星期日，2025年，2月5日课题1微生物的实验室培养第3页，共38页，星期日，2025年，2月5日一.培养基：1.基本成分：碳源、氮源、水、无机盐⑴碳源无机碳源：有机碳源：CO2、CO32-、HCO3-牛肉膏、蛋白胨等自养异养⑵氮源无机氮源：有机氮源：NH4＋、NO3-牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等注：含CHON的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源对不同需要，配置供生长繁殖的营养基质营养物质“吃”什么？第4页，共38页，星期日，2025年，2月5日一.培养基：微生物生存的环境和营养物质2.特殊营养：生长因子（维生素、碱基等）（牛肉膏、酵母膏、蛋白胨）3.pH、氧气的需求：4.种类：固体培养基液体培养基有无凝固剂琼脂分离鉴定工业生产细菌偏碱，真菌偏酸第5页，共38页，星期日，2025年，2月5日牛肉膏蛋白胨培养基配方(最广泛)1000mlH2O定容至1000mlNacl5g蛋白胨10g牛肉膏5g琼脂20.0g第6页，共38页，星期日，2025年，2月5日5.配制原则⑴目的明确：⑵营养全面、浓度适宜、比例恰当⑶适宜的pH值：有机碳源异养型：根据微生物的种类、培养目的选择原料自养型：不加碳源加入缓冲剂细菌偏碱，真菌偏酸（CO2碳源）生产科研第7页，共38页，星期日，2025年，2月5日1、关于微生物的营养，说法正确的是A、同一种物质不可能既作碳源又作氮源B、凡是碳源都能提供能量C、除水外的无机物仅提供无机盐D、无机氮源也能提供能量答案：D2、自养微生物和异养微生物最常用的碳源分别是A、CO2和CO2B、CO2和碳酸盐C、碳酸氢钠和含碳有机物D、CO2和含碳有机物答案：D第8页，共38页，星期日，2025年，2月5日一）内容：1、对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行2、将用于微生物培养的器皿、接种用具、培养基进行3、为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行4、实验操作时应避免二.无菌技术：防止外来杂菌的污染关键技术是什么？清洁和消毒灭菌酒精灯火焰已经灭菌处理的材料和用具与周围的物品接触超净工作台第9页，共38页，星期日，2025年，2月5日耐高温需保持干燥的物品，160～170℃1～2小时接种环、接种针等金属用具70~75℃、30min80℃、15min100℃、5~6min消毒灭菌定义方法较为温和理化方法，杀死部分有害菌体（不包括芽孢、孢子）强烈的理化方法，杀死所有微生物（包括芽孢、孢子）煮沸消毒法（日常）巴氏消毒法（如：牛奶）化学药剂紫外线灼烧灭菌干热灭菌（玻璃器皿）酒精、氯气、石炭酸等高压蒸汽灭菌培养基，100KPa、121℃、15～30min二.无菌技术：防止外来杂菌的污染.二）消毒与灭菌的区别：第10页，共38页，星期日，2025年，2月5日芽孢在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。煮沸3小时才死。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌.第11页，共38页，星期日，2025年，2月5日孢子在生物体的一定部位产生一种特殊