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2.2.2
动物细胞融合技术与单克隆抗体
本节聚焦:
●什么是动物细胞融合技术?
●单克隆抗体是如何制备的?
●单克隆抗体在临床上有哪些应用?;
植物细胞融合←—植物组织培养
植物体细胞杂交技术
植物体细胞杂交技术打破不同种植物之间生殖隔离的屏障,实现远缘杂交育种,
培育出新的作物类型。有没有技术让不同种动物的体细胞杂交,培育出集不同细
胞优势于一身的动物细胞呢?;
小鼠细胞
1970年人-鼠细胞融合融合实验;
杂种植物
植物
细胞A
去壁
①
植物
细胞B
去壁
①
植物细胞融合植物组织培养
植物体细胞杂交;
是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力,
但是并不破坏病毒的抗原结构。
紫外线丧失感染活性(不感染细胞)
灭活保留融合活性(诱导细胞融合);
病毒黏附使细胞凝聚膜打开膜融合细胞质融合细胞核融合
杂种细胞经第一次有丝分裂两个核才融合
细胞融合完成的标志:
细胞核融合成一个核;
(4)结果:
形成单核细胞,具有原来两个或多个细胞的遗传信息,可表现出两个或多个亲本的特点。
思考:诱导融合后的细胞一定具有双方的遗传信息吗?为什么?
不一定,诱导A、B两种细胞融合,融合后可能有A、B未融合细胞及
AA、AB、BB等多种细胞,因此细胞融合后需要进行筛选。
(5)意义:
○突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。
成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。
?利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术,为制造单克隆抗体开辟
了新途径。;
比较项目;
【典例1】如图为细胞融合的示意图,下列叙述
正确的是(A)
A.若a细胞和b细胞是植物细胞,需先去壁再诱导融合
B.若a细胞和b细胞为植物原生质体,则可用灭活的病毒诱导融合
C.c细胞的形成与a、b细胞膜的选择透过性有
D.c细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基;
前段时间,全国在抗击COVID-19疫情的时候,我们从新闻里看到很多康复者在捐献血浆,用来治疗其他病人。那么,血浆里到底是什么东西能够治疗新型冠状病毒感染?;
★什么???抗原?
能够引起机体产生特异性免疫应答的物质叫做抗原。
例如花粉、病菌、病毒等。
有时自身的组织或细胞也会成为抗原,如癌细胞等。
★什么是抗体?由何种细胞产生?主要分布在哪里?起何作用?
当机体受到抗原刺激后由浆细胞产生的,并且能与该
抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白一抗体。;
抗原(一种抗原可存在多种抗原决定簇)↓反复注射刺激
B细胞
↓增殖分化
浆细胞(多种)
从血清中分离抗体(多克隆抗体)
血清抗体(也称多克隆抗体)
由血清中提取的抗体是由不同浆细胞产
生的多种抗体的混合物,可达百万种以上。
特点:产量低、纯度低、特异性差、
反应不够灵敏。;
动物细胞工程3.单克隆抗体及其应用
(2)一个大胆的设想
将能够产生特定抗体的B淋巴细胞和具有无限增殖能力的骨
髓瘤细胞融合在一起,形成杂交瘤细胞。那这样就能够提高抗体的产
量、同时提高纯度和灵敏性。;
(2)一个大胆的设想
一获得单一的纯抗体?每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体
目大量?让B细胞大量繁殖(克隆)就可以产生大量抗体了。
B细胞不能无限增殖?癌细胞;
动物细胞工程3.单克隆抗体及其应用
阅读P48-49图2-16,思考以下问题:
日为什么给小鼠注射特定的抗原?
目会有几种细胞融合方式(只考虑两个细胞融合)?杂交瘤细胞是如何筛选出来的?
④是否所有的杂交瘤细胞都能产生专一性抗体?
⑤有几次筛选过程?目的是什么?
⑥如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体?;
动物细胞工程3.单克隆抗体及其应用
(3)单克隆抗体的制备过程
日为什么给小鼠注射用特定的抗原对小鼠进行免疫,并从该小鼠的特定的抗原?脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞。;
D途径能被氨基喋呤阻断。人淋巴细胞中有
这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中只有D途径,没有S途径。
B淋巴细胞骨髓瘤细胞(A)
D途径S途径D途径
氨基喋呤
氨基喋呤
合成DNA
既能产生抗体A-AA、B1、
又能大量增殖AB?AB3;
0
抗体检测板
【原理】将杂交瘤细胞培养液稀释后滴入多孔板,如
果稀释度足够高,多孔板的一个孔里就可能只有1个杂交瘤细胞,培养之后(即克隆化培养),用标记的抗原检测每个小孔上清液里是否含有我们需要的特异性
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