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诱变育种的基本环节大多死亡少数存活存活率多数未变少数突变突变率多数负变少数正变正变率多数幅度小少数幅度大高产率投产率多数不宜投产少数适宜投产出发菌株计算出诱变第55页,共115页,星期日,2025年,2月5日诱变育种工作中应考虑的几个原则选优良的出发菌株处理单孢子(或单细胞)悬液选用最适剂量设计或采用高效筛选方案或方法利用复合处理的协同效应利用和创造形态,生理与产量间的相关指标选择简便有效的诱变剂第56页,共115页,星期日,2025年,2月5日挑选优良的出发菌株生产中用过的自发变异菌株选用具有有利于进一步研究或应用性状的菌株采用已发生其他变异的菌株采用对诱变剂敏感性较高的增变变异株第57页,共115页,星期日,2025年,2月5日处理单孢子(或单细胞)悬液芽孢杆菌应处理芽孢放线菌,霉菌应处理孢子细菌指数期,放线菌霉菌要稍加萌发后使用出发菌株应制成均匀悬夜第58页,共115页,星期日,2025年,2月5日选择简便有效的诱变剂出发菌株含诱变剂的液体培养基接种培养培养接种分离紫外线选择优良突变株第59页,共115页,星期日,2025年,2月5日选用最适剂量剂量以诱变剂浓度和处理时间来表示合适剂量:能扩大变异幅度又能促使变异移向正变范围的剂量第60页,共115页,星期日,2025年,2月5日充分利用复合处理的协同效应两种或多种诱变剂先后使用同种诱变剂重复使用两种或多种诱变剂同时使用第61页,共115页,星期日,2025年,2月5日利用和创造形态,生理与产量间的相关指标淀粉酶变色圈试验变色圈大的为淀粉酶高产菌落第62页,共115页,星期日,2025年,2月5日设计或采用高效筛选方案或方法一个出发菌株诱变剂处理选出200个单孢子菌菌株初筛(每株1瓶)选出50株复筛(每株4瓶)选出5株第一轮第二轮五个出发菌株初筛(每株1瓶)选出50株复筛(每株4瓶)选出5株40株40株40株40株40株诱变剂处理第63页,共115页,星期日,2025年,2月5日(8)创造新型筛选方法1、初筛:以量为主2、复筛:以质为主第64页,共115页,星期日,2025年,2月5日突变株的筛选方法高产突变菌株的筛选方法抗性突变体的筛选方法营养缺陷型的的筛选方法与突变株的筛选相关的几个概念第65页,共115页,星期日,2025年,2月5日与突变株的筛选相关的几个概念相关培养基基本培养基:能够满足某一菌种的野生型菌株营养要求的最低成分的组合培养基。完全培养基:是在基本培养基中添加天然物质后能满足某种微生物各种营养缺陷型的营养要求的加富培养基。补充培养基:是在基本培养基中添加某种营养物质以满足该营养物质缺陷型菌株生长需求的加富培养基。第66页,共115页,星期日,2025年,2月5日与突变株的筛选相关的几个概念三类遗传型野生型[A+B+]营养缺陷型[A+B-]原养型[A+B+]第67页,共115页,星期日,2025年,2月5日突变春日霉素产生菌的孢子悬液·高产突变株的筛选琼脂块培养法筛选春日霉素高产菌种含供试菌种(拮抗对象)的琼脂平板第68页,共115页,星期日,2025年,2月5日梯度培养皿法强抗性中抗性弱抗性含异烟肼接敏感菌含突变株抗药性突变株的筛选第69页,共115页,星期日,2025年,2月5日营养缺陷型的筛选办法诱变剂处理淘汰野生型:青霉素浓缩法、菌丝过滤法、差别杀菌法检出缺陷型:夹层培养法、限量补充培养法、逐个检出法、影印接种法鉴定缺陷型中间培养第70页,共115页,星期日,2025年,2月5日淘汰野生型(青霉素浓缩法)培养基(含青霉素)接入诱变菌液(含抗性突变株)涂布培养第71页,共115页,星期日,2025年,2月5日淘汰野生型(差别杀菌法)1.适用于细菌的芽孢2.原理:将诱变处理的芽孢接种到基本培养基上,野生型的芽孢生长成营养细胞,而缺陷型的不能生长成营养细胞。第72页,共115页,星期日,2025年,2月5日检出缺陷型(夹层培养法)小菌落是第二次长起来的(营养缺陷型)第73页,共115页,星期日,2025年,2月5日检出缺陷型(限量补充培养法)微量蛋白胨的基本培养基上小菌落是营养缺陷
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