DB5117T 30-2020 达州黄花组织培养繁育技术规程　　.docxVIP

ICS65.020.20CCSB05

DB5117

四川省（达州市）地方标准DB5117/T30—2020

达州黄花组织培养繁育技术规程

TechnicalRegulationOfTissueCultureAndPropagationFor

HemerocalliscitrinaBaroniOfDaZhou

2020-12-17发布2020-12-17实施

达州市市场监督管理局发布

DB5117/T30-2020

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由达州市农业农村局提出并归口。

本文件起草单位：达州市农业科学研究院。

本文件主要起草人：李益、胡振兴、杨小丽、高龙梅、吴明阳、张玲、刘小英、贾荟芹、李薇、邓力、杨峰。

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引言

本文件第4.2.2章节—MS培养基配制，由于日常购买的白砂糖和琼脂质量存在差异，在规定浓度范围内自行选择用量不影响最终结果。

本文件第4.3章节—不同培养阶段培养基配制，在愈伤诱导培养基、继代培养基、分化培养基和生根培养基中加入70mg/L的抗菌剂，可减少杂菌污染的情况。生根培养基中加入2g/L的活性炭，可减少培养过程中褐化的现象。

本文件第4.10.2章节—继代培养，需控制愈伤组织大小，将直径大于2cm的愈伤组织切成直径2cm大小进行继代增殖。

本文件第5章节—炼苗，营养钵中基质成分及比例为泥炭土：珍珠岩：蛭石=1:1:1。

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达州黄花组织培养繁育技术规程

1范围

本文件规定了黄花组织培养繁育技术规程的术语和定义、组织培养繁育技术流程、炼苗的要求。本文件适用于达州市行政区域内黄花的组织培养育苗。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

LY/T1882林木组织培养育苗技术规程

3术语和定义

LY/T1882界定的以及下列术语和定义适用于本文件。

3.1

组织培养tissueculture

在无菌培养基上，对植物离体器官、组织或细胞进行培养，以形成再生植株，或培养新的育种材料的生物技术。

3.2

外植体explant

生长在培养基上的被培养的器官、组织或细胞。

3.3

培养基culturemedium

为外植体的生长、发育提供所需物质的基质。

3.4

组培苗tissuecultureseedling

利用外植体，在无菌和适宜的人工条件下，采用植物组织培养技术，培育出的完整植株。

3.5

接种inoculation

将外植体经消毒后，在无菌条件下植入培养基上的过程。

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3.6

褐化browning

在植物组织培养中，外植体由于自身分泌的酚类化合物被氧化产生褐色醌类物质，导致外植体褐变的现象。

4黄花组织培养繁育技术流程

4.1实验室要求

黄花组织培养实验室应包括：药品室、洗涤室、准备室、缓冲室、接种室、培养室，配备完善的水、电供应系统和空气、灯光、温度、湿度调节系统。

4.2培养基配制

4.2.1母液配制

按GB/T603、GB/T6682的规定执行。将培养基所需的大量元素、铁盐、有机成分配制成比使用浓度高100倍的母液，微量元素配制成比使用浓度高1000倍的母液，均用棕色玻璃瓶保存，贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期，保存在冰箱冷藏室中。

4.2.2MS培养基配制

按GB/T603、GB/T6682的规定执行。配制MS培养基时将四种母液按比例混合后，加入白砂糖、琼脂和水。所需白砂糖浓度为20g/L～30g/L，琼脂粉浓度为4g/L～6g/L。

4.3不同培养阶段培养基配制

4.3.1愈伤诱导培养基

MS+BA3.0mg/L+NAA0.1mg/L4.3.2继代培养基

MS+BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L4.3.3分化培养基

MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L4.3.4生根培养基

MS+NAA0.1mg/L

4.4培养基pH调节

黄花培养基最佳