动物细胞培养.pptVIP

关于动物细胞培养第1页，共24页，星期日，2025年，2月5日动物细胞工程常用的技术手段动物细胞培养—基础动物细胞融合生产单克隆抗体核移植纳归题问第2页，共24页，星期日，2025年，2月5日2.2.1动物细胞培养和核移植技术第3页，共24页，星期日，2025年，2月5日一、动物细胞培养为什么要进行动物细胞培养？材料一：在治疗烧伤病人时，通常是取病人的健康皮肤进行自体移植。对于大面积烧伤的病人，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，且会产生排斥反应。怎样才能获得大量的自体健康皮肤呢？材料二：许多动物细胞能分泌蛋白质，如抗体等。但是，单个细胞产生的蛋白质很少，怎样才能获得大量的分泌蛋白呢？境情设创第4页，共24页，星期日，2025年，2月5日１、什么是动物细胞培养？２、具体培养过程（1）为什么要把动物组织分散成单个细胞？完成44页两个问号。（2）什么叫细胞贴壁？什么叫接触抑制？（3）什么叫原代培养？什么叫传代培养？（4）总结出具体的培养过程？习学主自任务：阅读教材第44-46页第一段时间：4分钟问题：第5页，共24页，星期日，2025年，2月5日就是从动物机体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后,放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。1、概念：一、动物细胞培养纳归题问第6页，共24页，星期日，2025年，2月5日2、培养过程：纳归题问为什么要把动物组织分散成单个细胞？怎样分散成单个细胞的？完成44页两个问号成块的组织中细胞与细胞靠在一起，彼此限制了细胞的生长和增殖。另外，单个细胞所需的营养容易供应，其代谢废物容易排出。所以分散成单个细胞后培养。第7页，共24页，星期日，2025年，2月5日用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适宜环境pH为7.2～8.4。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，而胰蛋白酶在此环境中活性较高，因此胰蛋白酶适宜用于细胞培养时的消化。44页两个小问题的答案胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。纳归题问第8页，共24页，星期日，2025年，2月5日3、几个重要的概念细胞贴壁悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上(单层)。要求：培养瓶（皿）内表面光滑、无毒、易于贴附。纳归题问第9页，共24页，星期日，2025年，2月5日接触抑制当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。纳归题问第10页，共24页，星期日，2025年，2月5日原代培养传代培养贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理让细胞继续培养，这样的培养过程通常被称为传代培养。（即从原培养瓶内转接到新的培养瓶内过程。）通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。纳归题问第11页，共24页，星期日，2025年，2月5日细胞株传到40-50代后有部分细胞遗传物质发生了变化，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，可能在培养条件下无限制的传代下去。从原代培养细胞群中筛选出进行传代培养的细胞，能传到40-50代，其遗传物质没有发生变化。细胞系纳归题问注意目前使用的细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。第12页，共24页，星期日，2025年，2月5日动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液细胞悬浮液10代细胞部分细胞“癌变”，无限传代动物细胞培养不能最终培养成动物体50代细胞原代培养传代培养细胞贴壁剥离、分瓶细胞培养过程：分化程度低，增殖能力强去掉组织间蛋白第13页，共24页，星期日，2025年，2月5日细胞悬浮液10代细胞50代细胞无限传代原代培养传代培养细胞株细胞系细胞贴壁生长随细胞增多，出现接触抑制部分细胞癌变，失去接触抑制，无限传代纳归题问第14页，共24页，星期日，2025年，2月5日动物细胞培养都需要满足什么条件？习学主自任务：阅读教材第46页黑体字后面时间：4分钟问题：第15页，共24页，星期日，2025年，2月5日4、动物细胞培养条件无菌、无毒的环境（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）营养（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清、微量