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临床意义红细胞系(鉴别幼红细胞增生的性质良/恶)恶:M6(红白血病)、MDS时,幼红细胞为(+)为均匀红色或块状良:缺铁性贫血、地贫、再障、巨幼细胞性贫血时,幼红细胞为(-),个别阳性也很弱急性白血病的鉴别:急淋:强阳性,呈块状分布急粒:阳性,呈均匀分布的颗粒急单:阳性,呈灶状分布*急性淋巴细胞白血病阳性呈粗颗粒状*幼红细胞阳性呈弥散性或块状分布红系病态造血中性分叶核强阳性*鉴别淋系增生的性质恶性增生时淋巴细胞积分增高例如恶性淋巴瘤、霍奇金病淋巴细胞白血病等淋巴细胞积分正常病毒感染时*其他细胞的鉴别:戈谢细胞PAS强阳性;尼曼-匹克细胞空泡之间的胞浆呈阳性,空泡为阴性Reed-Sternberg(RS)里德-斯特恩伯格细胞细胞阴性或弱阳(诊断霍奇金淋巴瘤的典型细胞,又称镜影细胞)骨髓转移性腺癌强阳性PAS染色在诊断恶性红细胞系统疾病中最有价值尤其是强阳性,意义更大PAS染色受试剂等影响,可出现假阴性或假阳性*六、酯酶染色特异性酯酶(specificesterase,SE)氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色NAS-DCE(又称粒细胞酯酶)非特异性酯酶(nonspecificesterase,NSE)α-醋酸萘酚酯酶染色α-NAE*
(一)氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色
NaphtholAS-Dchloroacetateesterase
*原理氯乙酸AS-D萘酚被细胞内特异性酯酶水解产生AS-D萘酚,再与稳定的重氮盐(坚牢紫酱GBC)偶联,生成不溶性红色沉淀,定位于胞浆中。定位于胞浆与重氮盐偶联水解*结果阳性反应为红宝石颗粒,定位于胞浆中这种细胞内的氯乙酸AS-D萘酚酯酶(NAS-DCE)几乎仅出现在粒细胞,其特异性高,因此又称粒细胞酯酶,是急性白血病形态学分型时常规要做的组化染色,尤其有助于POX阳性的急粒及急单的鉴别。*重氮盐为坚牢蓝BB,呈现蓝色粒细胞强阳性*粒细胞白血病强阳性*同前*正常血细胞染色反应粒细胞系:分化差的原粒(-),分化好的原粒(+),早幼粒到成熟粒细胞各阶段均为强(+),且酶活性不随细胞的成熟而加强;嗜碱性粒细胞(+);嗜酸性粒细胞为(-)或弱(+)。单核细胞:绝大多数为(-),个别弱(+)。淋巴、红系、浆细胞、巨核细胞和血小板均(—)。*应用主要用于辅助鉴别急性白血病细胞类型,是急性白血病的常规化学染色1.急性粒细胞白血病原粒细胞(+)2.急性早幼粒细胞白血病早幼粒细胞强(+)3.急性单核细胞白血病原单及幼单(-)4.急性淋巴细胞白血病/急性巨核细胞白血病(-)5.急性粒-单细胞白血病原粒及早幼粒细胞(+)原单及幼单(-)*α-醋酸萘酚酯酶染色(α-NAE)
α-naphtholacetateesteraseα-醋酸萘酚酯酶存在于单核细胞、粒细胞和淋巴细胞中,是一种中性非特异性的酯酶。过去称为“单核细胞酯酶”(正常原单、幼单、成熟单核均阳性)单核细胞中此酶的阳性可被氟化钠抑制,所以做α-NAE染色时,通常同时作氟化钠抑制试验。*原理血细胞中的α-醋酸萘酚酯酶将α-醋酸萘酚水解产生α-萘酚,后者再与重氮盐(如坚牢蓝B)偶联,生成不溶性的有色沉淀(灰色或棕黑色)。H偶联定位于酶活性所在处水解*结果阳性:胞浆内有灰黑或棕黑弥漫性或颗粒状沉淀,定位清楚阴性:胞浆内无沉淀*NaF抑制试验抑制率>50%以相同方法置备两份作用液,其中一份加入适量NaF,另一份不加;将已固定好的两张相同的标本涂片分别浸入两种作用液中,进行染色。用油镜观察计数100个或200个细胞,分别计算出抑制前和抑制后的阳性率或积分值,求出抑制率。氟化钠抑制率=(抑制前阳性率—抑制后阳性率)/抑制前阳性率×100%
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